廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌BRCA1突變及其相關(guān)組織病理改變和超聲影像特征的研究.pdf

1、第一部分超聲診斷體系（常規(guī)超聲結(jié)合彈性成像）對(duì)乳腺癌的瞻前性研究
　　目的：探討常規(guī)超聲結(jié)合彈性成像（Ultrasound Elastography UE）診斷體系對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值，提高超聲對(duì)乳腺癌的診斷水平。
　　方法：應(yīng)用超聲診斷體系（常規(guī)高頻超聲結(jié)合UE）對(duì)乳腺腫塊患者進(jìn)行檢查，借鑒美國(guó)放射學(xué)會(huì)(American college of radiology，ACR)的乳腺影像報(bào)告和數(shù)據(jù)系統(tǒng)(Breast Imaging

2、 Reporting and Data System，BI-RADS)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)檢查數(shù)據(jù)進(jìn)行規(guī)范評(píng)分評(píng)級(jí)，評(píng)價(jià)其對(duì)診斷乳腺癌的診斷價(jià)值。研究對(duì)象為2010年5月～2011年12月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸腺體外科住院的女性乳腺腫塊患者502例，共567個(gè)腫塊。所有患者術(shù)前均未作過(guò)任何化療、放療或性激素類(lèi)藥物等治療，臨床和病理資料完整。超聲檢查采用GE LOGIQ E9彩色超聲診斷儀，探頭頻率6～15 MHz。超聲診斷體系包括常規(guī)超聲:二

3、維超聲(Two Dimensional Ultrasonography,2DUS)、彩色多普勒血流成像(Color Doppler flow imaging，CDFI)、CDFI血流顯示處行脈沖波多普勒(Pulsed wave Doppler，PW)及UE。超聲檢查雙側(cè)乳腺及掃查雙側(cè)腋窩有無(wú)腫大淋巴結(jié)，采用CDFI觀察腫塊內(nèi)部及周邊血流分布情況。借鑒BI-RADS評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，記錄腫塊的數(shù)目、分布、位置、大小、形態(tài)、縱橫之比、有無(wú)邊緣毛刺征

4、、后方回聲衰減、微鈣化、與周?chē)M織關(guān)系、腋窩腫大淋巴結(jié)及病灶內(nèi)部的血供豐富程度，對(duì)超聲征象進(jìn)行規(guī)范評(píng)分，≥3分判為惡性可能性大;然后進(jìn)入U(xiǎn)E模式獲取腫塊硬度特征，根據(jù)羅葆明改良5分法進(jìn)行彈性評(píng)分。術(shù)前根據(jù)超聲診斷體系對(duì)乳腺腫塊的進(jìn)行超聲診斷評(píng)級(jí):Ⅰ級(jí):陰性，未發(fā)現(xiàn)異常病灶;Ⅱ級(jí):肯定為良性病變;Ⅲ級(jí):可能為良性病變，3-6個(gè)月復(fù)查;Ⅳ級(jí):可疑惡性，需組織活檢;Ⅴ級(jí):高度可能惡性。超聲診斷體系評(píng)級(jí)≥Ⅳ級(jí)為符合惡性腫塊（癌）的診斷，以病理結(jié)

5、果金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)超聲診斷體系進(jìn)行評(píng)估。
　　結(jié)果：1.病理結(jié)果診斷為354個(gè)良性腫塊，213個(gè)惡性腫塊。超聲檢查惡性組與良性組的各項(xiàng)指標(biāo)（形態(tài)不規(guī)則、邊緣呈分葉或毛刺征、微鈣化、腫塊后方回聲衰減、腫塊內(nèi)血流達(dá)Ⅱ～Ⅲ級(jí)、RI≥0.70）間均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.常規(guī)超聲診斷乳腺癌的敏感性為89.2％，特異性為81.9％，準(zhǔn)確性為84.7％。UE診斷乳腺癌的敏感性為85.9％，特異性為89.8％，準(zhǔn)確性為88.3％。常規(guī)超聲聯(lián)合UE診斷乳腺癌

6、的敏感性為93.8％，特異性為88.1％，準(zhǔn)確性為90.3％。3.常規(guī)超聲聯(lián)合UE的準(zhǔn)確性高于常規(guī)超聲，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=369.5，P＜0.001)，同時(shí)也高于UE診斷準(zhǔn)確性(x2=332.2，P＜0.001)。
　　結(jié)論：常規(guī)超聲與UE聯(lián)合的超聲診斷體系可提高診斷乳腺癌的敏感性和準(zhǔn)確性，對(duì)鑒別乳腺良惡性腫塊具有較高的應(yīng)用價(jià)值。
　　第二部分廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌BRCA1基因突變檢測(cè)及分析
　　目的：檢測(cè)廣西地

7、區(qū)散發(fā)性乳腺癌患者BRCA1基因的突變情況，探討B(tài)RCA1基因突變與廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌的關(guān)系。
　　方法研究對(duì)象為2010年5月至2011年12月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸腺體外科收治，經(jīng)超聲診斷體系評(píng)級(jí)≥4的200例女性散發(fā)性乳腺癌患者，發(fā)病中位年齡為47歲（24～81歲）。本組患者術(shù)前均未作過(guò)任何化療、放療或性激素類(lèi)藥物等治療，臨床和病理資料完整，病理診斷均經(jīng)專(zhuān)家教授復(fù)核。實(shí)驗(yàn)組取靜脈血提取基因組DNA，用Primer

8、premier5軟件設(shè)計(jì)引物，并借助軟件Oligo7評(píng)價(jià)引物，然后對(duì)BRCA1基因的全部編碼序列及外顯子內(nèi)含子拼接區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物直接通過(guò)DNA序列測(cè)序進(jìn)行突變分析。另取30例健康女性靜脈血作為對(duì)照組。
　　結(jié)果：對(duì)照組30例健康女性未檢測(cè)出BRCA1基因突變。實(shí)驗(yàn)組200例乳腺癌患者中有17例發(fā)生了BRCA1基因突變，突變位于第10外顯子，突變頻率為8.5％。其中，2例為同義突變:1624C＞T、2029T＞C;1例為移碼突

9、變:4200delAAAT;1例為無(wú)義突變:3452AGAAACA＞TT;13例為錯(cuò)義突變:1例1268 C＞T，1例3971G＞A，2例1227 G＞A，1例2309G＞A，4例2238T＞C，4例2798T＞C。此外，BRCA1還發(fā)現(xiàn)了6個(gè)單核苷多態(tài)位點(diǎn):2314C/T(rs1799949，NM007300.3)，2543T/C(rs16940，NM007300.3),2844C/T(rs799917，NM007300.3),334

10、5A/G(rs16941,NM007300.3),3780A/G(rs16942,NM007300.3),6308T/G(rs8176318,NM007300.3)。它們均為已報(bào)道的位點(diǎn)，其中4個(gè)位點(diǎn)可以引起氨基酸編碼改變。
　　結(jié)論：本研究豐富了廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌患者BRCA1基因的突變譜，提示了BRCA1基因的突變對(duì)于廣西地區(qū)人群中散發(fā)性乳腺癌的發(fā)生也可能有較重要意義。本研究還提示集中對(duì)BRCA1基因的第10號(hào)外顯子進(jìn)行突變

11、篩查可提高效率，減少成本，為未來(lái)的臨床基因檢測(cè)提供篩查模式。
　　第三部分BRCA1基因突變?nèi)橄侔┑南嚓P(guān)組織病理改變及超聲影像學(xué)特征分析
　　目的對(duì)第二部分研究中散發(fā)性乳腺癌的17例BRCA1基因突變者的相關(guān)病理組織改變及超聲影像學(xué)特征進(jìn)行初步研究。
　　方法選取200例散發(fā)性乳腺癌患者中未發(fā)現(xiàn)BRCA1突變的183例乳腺癌患者為對(duì)照，與17例BRCA1基因突變?nèi)橄侔┗颊叩南嚓P(guān)病理改變及超聲影像學(xué)特征進(jìn)行對(duì)比分析。病理

12、檢查由病理科醫(yī)生完成。超聲檢查方法同第一部分。
　　結(jié)果1.17例BRCA1突變?nèi)橄侔┗颊卟±眍A(yù)后指標(biāo)顯示三陰性乳腺癌為35.3％，HER2陰性表達(dá)率高達(dá)64.7％。2.在超聲影像學(xué)特征方面，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組乳腺癌病例形態(tài)不規(guī)則者分別為12(70.58％)和164(89.62％)，邊緣呈分葉或毛刺征者分別為10(58.82％)和112(61.20％)，微鈣化者分別為7(41.18％)和84(45.90％)，腫塊后方回聲衰減者分別為5

13、(29.41％)和74(40.43％)，腫塊內(nèi)血流達(dá)Ⅱ～Ⅲ級(jí)者分別為9(52.94％)和130(71.04％)，RI≥0.70者分別為10(58.82％)和124(67.76％)，實(shí)驗(yàn)組超聲體系評(píng)級(jí)≥4級(jí)為11例，占該組病例的64.70％;對(duì)照組超聲體系評(píng)級(jí)≥4級(jí)為165例，占該組病例的90.16％，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=9.54，P=0.002); UE評(píng)分＞3分者分別為14(82.35％)和158(86.33％)，差異無(wú)統(tǒng)

14、計(jì)學(xué)意義，(P＞0.05)。
　　結(jié)論本研究顯示BRCA1基因突變?nèi)橄侔┱吲cHER2陰性表達(dá)關(guān)系密切。BRCA1突變?nèi)橄侔┰谛螒B(tài)、邊緣、有無(wú)微鈣化、腫塊后方回聲及腫塊內(nèi)部血流等方面的常規(guī)超聲表現(xiàn)較多趨向于良性病灶的聲像學(xué)特征。
　　全文總結(jié)
　　1.常規(guī)超聲與UE聯(lián)合的超聲診斷體系可提高診斷乳腺癌的敏感性和準(zhǔn)確性，對(duì)鑒別乳腺良惡性腫塊具有較高的應(yīng)用價(jià)值。
　　2.對(duì)200例散發(fā)性乳腺癌患者的BRCA1基因研究豐富