中國乳腺癌遺傳高風(fēng)險(xiǎn)人群BRCA1-2突變特點(diǎn)及其與乳腺癌臨床病理特征相關(guān)關(guān)系研究.pdf

1、研究背景和目的:
　　根據(jù)《2015年中國癌癥統(tǒng)計(jì)》報(bào)道，乳腺癌在中國女性癌癥發(fā)病率中占首位，約占每年新發(fā)癌癥的15％;在年齡小于45歲的人群中，乳腺癌是引起女性癌癥性死亡的首要原因[1]。
　　乳腺癌是在多種因素的共同作用下發(fā)生的，其中，家族史是導(dǎo)致乳腺癌發(fā)病的重要因素之一。有研究表明，大約15-20％的乳腺癌患者伴有明顯的家族病史[2]。在美國，對(duì)于家族背景信息提示可能具有腫瘤的遺傳高風(fēng)險(xiǎn)的家族成員，疾病控制與預(yù)防中心將

2、建議其進(jìn)行基因檢測(cè)，以確定本人的患癌風(fēng)險(xiǎn)。
　　隨著基因測(cè)序及解讀技術(shù)的發(fā)展，越來越多的基因被證明與乳腺癌的發(fā)病相關(guān)。其中，BRCA1和BRCA2基因是最早被發(fā)現(xiàn)的也是目前被認(rèn)為與遺傳性乳腺癌發(fā)病最為密切相關(guān)的兩個(gè)基因[3-5]。有研究報(bào)道，在家族性乳腺癌患者中，20-25％為BRCA1或BRCA2基因突變的攜帶者[6，7]。
　　在乳腺癌患者中，BRCA1/2基因突變攜帶者具有不同于非攜帶者的特點(diǎn)。攜帶BRCA1/2基因突

3、變的乳腺癌患者，對(duì)側(cè)乳腺癌的患病風(fēng)險(xiǎn)明顯增高:散發(fā)性乳腺癌患者10年對(duì)側(cè)乳腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)為1％，而攜帶BRCA1/2基因突變的乳腺癌患者10年對(duì)側(cè)乳腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)高達(dá)25％[8]。此外，對(duì)于已鑒別出攜帶BRCA1/2基因突變的正常人群，規(guī)律地自檢及體檢可以有效地監(jiān)測(cè)腫瘤發(fā)生，必要時(shí)可進(jìn)行藥物預(yù)防或手術(shù)預(yù)防[9]。
　　除了預(yù)測(cè)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，BRCA1/2基因檢測(cè)結(jié)果還可有助于臨床治療決策的制定。越來越多的對(duì)BRCA1/2基因突變患者敏感的

4、藥物目前已被發(fā)現(xiàn)，這為改善遺傳性乳腺癌患者的預(yù)后奠定了良好的基礎(chǔ)。
　　因此，如何有效地篩選出遺傳性乳腺癌患者及遺傳性乳腺癌相關(guān)基因突變攜帶者至關(guān)重要。而目前，關(guān)于中國人群BRCA1/2基因突變情況由于缺乏大規(guī)模的樣本觀測(cè)數(shù)據(jù)尚未形成一致共識(shí)，對(duì)于如何有效地選擇基因檢測(cè)的目標(biāo)人群也尚未形成統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。本研究利用NGS技術(shù)，對(duì)中國人群中遺傳高風(fēng)險(xiǎn)乳腺癌患者外周血BRCA1/2基因49個(gè)外顯子序列進(jìn)行檢測(cè)分析，尋找致病性突變位點(diǎn)、SN

5、Ps位點(diǎn)，并分別探討其與乳腺癌臨床病理特征之間的關(guān)系，旨在能(1)豐富中國人群BRCA1/2基因突變數(shù)據(jù)庫;(2)有助于建立適合中國人群的乳腺癌遺傳風(fēng)險(xiǎn)基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)模型，從而更好地篩查并防治乳腺癌。
　　研究方法:
　　1.研究對(duì)象的收集于2015年5月至2016年5月就診于第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)海醫(yī)院，滿足入組條件并經(jīng)病理證實(shí)的乳腺癌患者。本研究共收集符合標(biāo)準(zhǔn)的研究對(duì)象71例。
　　2.基因檢測(cè)方法利用NGS技

6、術(shù)對(duì)患者外周血中BRCA1和BRCA2基因49個(gè)外顯子序列進(jìn)行檢測(cè)及分析，鑒別出有害突變位點(diǎn)及SNP位點(diǎn)。
　　3.臨床病理資料收集通過病歷記錄、病理報(bào)告及電話隨訪確認(rèn)并收集完整的臨床及病理資料。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理發(fā)病年齡、月經(jīng)初潮年齡及首次妊娠年齡等計(jì)量資料間的比較采用t檢驗(yàn);是否為雙側(cè)原發(fā)性乳腺癌、有無乳腺癌或卵巢癌家族史及腫瘤臨床病理特征指標(biāo)等計(jì)數(shù)資料間的比較采用x2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)(α)為0.05。統(tǒng)計(jì)分析采用統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、軟件SPSS22.0(IBM，Armonk，New York)進(jìn)行。
　　結(jié)果:
　　第一部分 BRCA1/2有害突變攜帶情況及其與乳腺癌臨床病理特征關(guān)系
　　本研究共檢出13例有害突變攜帶者，有害突變攜帶率為18.3％。該13例患者中共涵蓋有害突變位點(diǎn)11個(gè)，6個(gè)位于BRCA1基因，5個(gè)位于BRCA2基因。其中7個(gè)有害突變位點(diǎn)在亞洲人群中尚未見報(bào)道。位于BRCA1基因的c.3626T＞G和位于BRCA2基因的c.38

8、83C＞T為無義突變，導(dǎo)致蛋白翻譯的提前終止。
　　乳腺癌臨床病理特征與是否攜帶BRCA1/2基因有害突變存在顯著相關(guān)性。攜帶BRCA1/2基因有害突變的患者更傾向于Her2表達(dá)陰性(93.3％ vs.57.8％，P=0.014)，傾向于更高的腫瘤組織學(xué)分級(jí)(P=0.009)以及有乳腺癌或卵巢癌家族史(66.7％ vs.32.8％，P=0.021)。BRCA1基因有害突變攜帶者傾向于HR表達(dá)陰性，BRCA2基因有害突變攜帶者更傾向

9、于HR表達(dá)陽性。
　　第二部分 BRCA1/2編碼區(qū)SNP攜帶情況及其與乳腺癌臨床病理特征關(guān)系
　　本研究共檢出34個(gè)SNP位點(diǎn)，其中14個(gè)位于BRCA1基因，20個(gè)位于BRCA2基因。在34個(gè)SNP位點(diǎn)中，18個(gè)為高頻突變位點(diǎn)，16個(gè)為低頻突變位點(diǎn)。在18個(gè)高頻突變位點(diǎn)中，僅rs799917位點(diǎn)的突變頻率小于正常人群攜帶頻率。
　　其中，rs80356892位點(diǎn)多態(tài)性與患者臨床病理特征存在顯著的相關(guān)性。該突變?cè)诒狙芯?/p>

10、中的檢出頻率為7.0％，明顯高于正常人群攜帶頻率。攜帶rs80356892位點(diǎn)突變的患者傾向于發(fā)生雙側(cè)原發(fā)性乳腺癌(60.0％vs.7.6％，P=0.004)、有乳腺癌或卵巢癌家族史(100.0％ vs.43.7％，P=0.008)以及表現(xiàn)為TNBC(87.5％ vs.18.3％，P＜0.001)。另外，rs80356892位點(diǎn)突變與腫瘤HR表達(dá)為陰性相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1.目前可鑒別的BRCA1/2基因有害突變僅為遺傳

11、性乳腺癌發(fā)生的原因之一，另外仍有其他有害突變位點(diǎn)或其他基因的突變可導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)生。
　　2.由于遺傳高風(fēng)險(xiǎn)乳腺癌患者BRCA1/2基因突變風(fēng)險(xiǎn)高于散發(fā)性乳腺癌患者及健康人群，因此必要時(shí)可建議其進(jìn)行基因檢測(cè)，從而采取有針對(duì)性的防治措施。
　　3.本研究通過基因檢測(cè)及分析，豐富了中國人群乃至亞洲人群BRCA1/2基因突變數(shù)據(jù)庫，有助于建立更優(yōu)的乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)模型及更適合于中國人群的BRCA1/2基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，從而更好地預(yù)防