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文檔簡介
1、 本研究由4~7周胚胎中分離出人PGC,在體外培養(yǎng)下形成表達人EG細胞標志的細胞集落;對PGC原代培養(yǎng)集落進行誘導,產(chǎn)生增殖能力較強、具有向三胚層分化潛能的原始生殖細胞來源的前體細胞系(PGCP);將PGCP細胞系移植入胎羊體內(nèi),觀察其在胎羊體內(nèi)向肝臟細胞分化的潛能。本論文分為三部分:第一部分,人原始生殖細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定。由4~7周人流產(chǎn)胚胎的腸系膜及生殖嵴分離出人PGC細胞。第二部分:人PGC細胞來源的PGCP細胞系。經(jīng)RT
2、-PCR檢測人EG細胞相關(guān)基因表達陽性的原代培養(yǎng)細胞集落,在EBM-2培養(yǎng)液中誘導培養(yǎng),建立PGCP細胞系。第三部分:PGCP細胞在胎羊體內(nèi)向肝臟細胞的分化。在B超引導下經(jīng)皮穿刺,將0.3~3×107的PGCP細胞移植入發(fā)育40~70天胎羊的腹腔/肝臟內(nèi)。 結(jié)論:1.由早期胚胎分離出的人PGC細胞,體外培養(yǎng)可形成表達人EG細胞相關(guān)標志的細胞集落。2.本實驗室建立的PGCP細胞系,在體外培養(yǎng)條件下有較強的增殖能力和向多胚層
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