BMP7通過BMPR1A、BMPR1B抑制肺大細(xì)胞癌NCI-H460細(xì)胞的增殖.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文BMP7通過BMPR1A、BMPR1B抑制肺大細(xì)胞癌NCIH460細(xì)胞的增殖姓名：徐慧慧申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：邱雪杉20090301和侵襲的影響。最后我們在NCIH460細(xì)胞中通過特異性抗體分別阻斷不同的1型受體，研究hBMP7處理后細(xì)胞增殖能力的改變，探討了不同的I型受體在BMP7信號傳導(dǎo)過程中的作用機(jī)制。材料和方法一、細(xì)胞株和試劑肺腺癌A549、LTE，肺鱗癌SPC和肺大細(xì)胞癌N

2、CIH460細(xì)胞株購自；DMEM培養(yǎng)基購自美國GIBCOBRL公司；鼠單克隆抗人BMP7、BMPRlA、BMPRlB、ACVRIA抗體均購自SantaCruz公司；兔多克隆抗人13actin抗體由北京中杉金橋生物技術(shù)公司分裝；山羊抗小鼠、山羊抗兔二抗購自北京中杉金橋生物技術(shù)公司；RTPCR試劑盒購自Takara公司。二、細(xì)胞培養(yǎng)肺腺癌細(xì)胞A549在含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中貼壁生長；人支氣管上皮細(xì)胞HBE在含15％胎牛血清的RP

3、MI一1640培養(yǎng)液中貼壁生長；NCLNCIH460、SPCA1、LTEPa2在含10％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中貼壁生長，均在37℃，5％C02條件下培養(yǎng)。三、RTPCR提取細(xì)胞總RNA，按RTPCR(TaKaRa)試劑盒方法進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，反應(yīng)體系為20#L，取矩L的l汀產(chǎn)物進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)體系為20／tL。PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測，采用凝膠成像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。四、SDSPAGE電泳和WesternBlo