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文檔簡介
1、目的:從臨床標(biāo)本中分離幽門螺桿菌,建立胃炎與胃癌相關(guān)幽門螺桿菌的雙向凝膠電泳圖譜,并識別鑒定其差異表達(dá)的蛋白質(zhì),探討細(xì)菌本身因素在發(fā)病過程中的作用。 方法:胃鏡下鉗取標(biāo)本后分離、培養(yǎng),并應(yīng)用革蘭染色及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),鑒定所分離的幽門螺桿菌菌株;利用固相pH梯度雙向凝膠電泳分離胃炎與胃癌相關(guān)幽門螺桿菌菌株的總蛋白質(zhì),凝膠經(jīng)藍(lán)銀顯色后,PDQuest圖像分析軟件進(jìn)行比較分析、識別差異表達(dá)的蛋白質(zhì),應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行
2、時間質(zhì)譜(MALDT-TOF-MS)得到相應(yīng)的肽質(zhì)指紋圖譜,然后搜索數(shù)據(jù)庫鑒定部分差異蛋白質(zhì)點(diǎn)。 結(jié)果:所分離的菌株均為幽門螺桿菌;得到了分辨率較高、重復(fù)性較好的胃炎與胃癌相關(guān)幽門螺桿菌雙向凝膠電泳圖譜,鑒定出14個差異蛋白質(zhì),這些差異蛋白質(zhì)點(diǎn)包括抗氧化作用、分子伴侶、解毒和DNA修復(fù)相關(guān)蛋白質(zhì)、三大代謝相關(guān)酶類、細(xì)胞結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白質(zhì)以及信號傳導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)六類。 結(jié)論:成功地從臨床標(biāo)本中分離到幽門螺桿菌,建立了分辨率高且重
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