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文檔簡介
1、EZH2是具有組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性的蛋白,參與X染色體失活、細(xì)胞分化和胚胎發(fā)育調(diào)節(jié)。在前列腺癌、肝癌、淋巴瘤、乳腺癌等多種腫瘤中EZH2都會過量表達(dá),在腫瘤耐藥株細(xì)胞中表達(dá)量更高。EZH2與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切,能促進(jìn)細(xì)胞增殖、腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移的惡性表型。Trx1在多種腫瘤中也過量表達(dá),能促進(jìn)腫瘤的生長和抑制由抗腫瘤藥物引起的細(xì)胞凋亡。因此,EZH2和Trx1都可能作為阻止腫瘤發(fā)生和治療腫瘤的分子靶點(diǎn)。我們研究發(fā)現(xiàn)EZH2可通過調(diào)控
2、Trx1參與肝癌耐藥,其結(jié)果如下:
1)肝癌細(xì)胞Bel7402中EZH2和Trx1表達(dá)量隨5-FU添加量增加而增加,而耐5-FU的肝癌細(xì)胞Bel7402/5-FU中EZH2和Trx1表達(dá)量沒有明顯變化。進(jìn)一步沉默Bel7402/5-FU細(xì)胞中EZH2或Trx1水平使細(xì)胞對5-FU耐受性降低,而過表達(dá)EZH2或Trx1使Bel7402細(xì)胞耐受5-FU處理,但EZH2作用的效果與其SET區(qū)域無關(guān)。上述結(jié)果說明EZH2與Trx1都參
3、與肝癌細(xì)胞耐藥性。
2)將編碼EZH2蛋白的基因分成四個片段,插入原核載體中表達(dá)出GST融合蛋白,通過GST pull-down的方法發(fā)現(xiàn)Trx1與EZH2-C存在直接相互作用。進(jìn)一步在Bel7402細(xì)胞中表達(dá)帶標(biāo)簽的外源EZH2和Trx1,通過Co-IP實(shí)驗發(fā)現(xiàn)表達(dá)的帶標(biāo)簽外源蛋白質(zhì)EZH2和Trx1存在相互作用。
3)EZH2過量表達(dá)上調(diào)Trx1活性,對EZH2表達(dá)進(jìn)行干擾時能降低Trx1活性,說明EZH2能夠上
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