硫酸軟骨素提取條件優(yōu)化研究.pdf

1、硫酸軟骨素(ChondritinSulfate)多分布于軟骨、鼻骨、喉骨、韌帶、肌膜中，魚類軟骨中含量很豐富。CS臨床上主要用于治療神經(jīng)痛、關(guān)節(jié)炎、耳鳴以及促進(jìn)潰瘍愈合和防止高血脂癥等。隨著其生理功能及生化性質(zhì)的深入研究，發(fā)現(xiàn)它具有凝血和防止血管硬化等功效，對(duì)冠心病、心肌梗塞等心血管病的防治有較好的療效，還對(duì)神經(jīng)細(xì)胞、粘膜細(xì)胞、腎細(xì)胞等具有保護(hù)作用；CS還可與某些物質(zhì)調(diào)制成化妝品用于保護(hù)皮膚的健美。 本研究試驗(yàn)的內(nèi)容是：以雞胸軟

2、骨為原料，選取硫酸軟骨素的最佳生產(chǎn)工藝條件。硫酸軟骨素的生產(chǎn)方法主要有以下幾種：(一)中性鹽法；(二)堿提取法；(三)酶提取法；(四)超聲波法；(五)乙酸抽提法。單純的堿提取廢液污染環(huán)境嚴(yán)重，而單一的酶解提取成本較高。本文選用堿解—酶解相結(jié)合的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。如何節(jié)省原料，減少環(huán)境污染，提高硫酸軟骨素的產(chǎn)品產(chǎn)量和質(zhì)量是本研究的關(guān)鍵。 硫酸軟骨素與蛋白質(zhì)等成分結(jié)合在一起，用堿提取有利于破壞硫酸軟骨素與蛋白質(zhì)之間的共價(jià)鍵使硫酸軟骨

3、素釋放出來(lái)，所以堿提取過程是提高硫酸軟骨素收率的關(guān)鍵。酶水解過程是提高硫酸軟骨素產(chǎn)品純度的關(guān)鍵，蛋白質(zhì)是硫酸軟骨素中最主要的雜質(zhì)之一，通過酶解處理使溶液中及硫酸軟骨素長(zhǎng)鏈上的蛋白進(jìn)一步得到水解破壞，形成為可溶性小分子肽、氨基酸等物質(zhì)。由于一次酶解，氮含量很難達(dá)到要求，所以采用雙酶進(jìn)行酶解。所做的試驗(yàn)結(jié)果如下： (Ⅰ)、在堿解部分，本研究選取料液比(軟骨質(zhì)量與堿液體積之比)、堿液濃度、反應(yīng)溫度、濾液的pH值、反應(yīng)時(shí)間等因素進(jìn)行正交

4、實(shí)驗(yàn)，以硫酸軟骨素產(chǎn)率為考察對(duì)象，對(duì)影響產(chǎn)率的因素進(jìn)行考察，確定出了主要的考察因素為料液比、反應(yīng)溫度和堿液濃度。并在此基礎(chǔ)上對(duì)這些主要的影響因素進(jìn)行了單因素優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得出了產(chǎn)率最高的工藝條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：料液比為1∶6.75，反應(yīng)溫度為40℃，堿液濃度為6％時(shí)，硫酸軟骨素的產(chǎn)率最高，可達(dá)20.67％。 (Ⅱ)、在酶解部分，本文選取胰蛋白酶和胃蛋白酶兩種酶進(jìn)行水解反應(yīng)。本研究選取料液比，水解溫度，pH值和水解時(shí)間等因素進(jìn)行正交實(shí)

5、驗(yàn)，以硫酸軟骨素純度為考察對(duì)象，確定了主要的考察因素，對(duì)影響純度的因素進(jìn)行了探討，并在此基礎(chǔ)上對(duì)這些主要影響因素進(jìn)行了單因素優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得出了硫酸軟骨素純度最高的工藝條件：胰蛋白酶在pH值為8.3，料液比為1000∶0.9，水解溫度為46℃；胃蛋白酶在pH值為5.9，水解時(shí)間為1小時(shí)40分鐘，料液比為1000∶1.1，水解溫度為40℃，所得硫酸軟骨素的純度最高，可以達(dá)到85.65％。 (Ⅲ)、各個(gè)影響因素對(duì)含氮量均有影響，通過試驗(yàn)