補(bǔ)體C3在大鼠骨癌痛中的作用及其機(jī)制.pdf

1、目的:探討補(bǔ)體C3在大鼠骨癌痛中的作用及機(jī)制。
　　方法:(1)39只大鼠分為假手術(shù)組(sham組)15只和骨癌痛組(CIBP組)24只,構(gòu)建模型后第7、14、21d測痛并各處死5只、8只,取脊髓腰膨大部位,分別測定補(bǔ)體C3和星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)表達(dá)的變化。
　　(2)6只成功鞘內(nèi)置管的骨癌痛模型大鼠術(shù)后第11d隨機(jī)分為生理鹽水組(CIBP+

2、NS組)和C3抑制劑compstatin組(CIBP+compstatin)兩組,鞘內(nèi)分別注射無菌生理鹽水或者compstatin15μl(0.4mg/ml),每日兩次,持續(xù)給藥10d。術(shù)后第21d處死分別用免疫熒光測定兩組脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物GFAP的表達(dá)。
　　(3)體外培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞分為control組和compstatin組,后者的培養(yǎng)基中添加C3抑制劑compstatin。培養(yǎng)3d,然后用EdU試劑盒檢測星形膠質(zhì)細(xì)

3、胞增殖活性的變化。
　　結(jié)果:(1)骨癌痛組大鼠術(shù)后14d機(jī)械痛閾值為19.43±4.66,與術(shù)前(23.40±5.00)相比痛閾值顯著性降低(P<0.05);術(shù)后21d痛閾為19.11±4.94,與術(shù)前(23.89±5.04)及sham(27.88±5.33)組相比痛閾值顯性降低(P<0.05)。Real-timePCR測定脊髓C3mRNA表達(dá)量,CIBP大鼠在術(shù)后第7dC3表達(dá)量為2.52±0.67,在術(shù)后第14dC3表達(dá)量為

4、8.94±2.15,在術(shù)后第21dC3表達(dá)量為9.55±2.91;與sham組相比,術(shù)后第14、21dC3表達(dá)量顯著升高(P<0.05)。免疫熒光檢測脊髓補(bǔ)體C3和GFAP表達(dá)的變化,與sham組相比,CIBP大鼠C3在術(shù)后14d時(shí)表達(dá)增高最為明顯,GFAP在術(shù)后21d時(shí)表達(dá)增高最為明顯。
　　(2)骨癌痛大鼠鞘內(nèi)給予補(bǔ)體抑制劑compatatin后,免疫熒光顯示脊髓GFAP表達(dá)降低。
　　(3)體外培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞,co

5、mpstatin組細(xì)胞增殖陽性率為34.5％±15.6%,control組細(xì)胞增殖陽性率為60.6%±6.6%。與control組相比,compstatin組細(xì)胞的增殖率明顯減低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論:骨癌痛大鼠脊髓補(bǔ)體C3表達(dá)量和星形膠質(zhì)細(xì)胞活性均升高,鞘內(nèi)給予補(bǔ)體抑制劑compstatin后可以抑制骨癌痛大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞活性,compstatin能夠下調(diào)體外培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖能力。補(bǔ)體C3可以