大麻素受體2在脛骨癌痛大鼠脊髓的表達(dá)及其作用.pdf

1、目的：探討大麻素受體2(CB2)在脛骨癌痛大鼠脊髓的表達(dá)及其作用。
　　 方法：第一部分：雌性SD大鼠72只，體重160～180g，隨機(jī)分為6組(n=12):假手術(shù)7d組（Sham7）、骨癌痛7d組(BCP7)、假手術(shù)14d組(Sham14)、骨癌痛14d組(BCP14)、假手術(shù)21d組(Sham21)、骨癌痛21d組(BCP21),分別于接種癌細(xì)胞前1d、接種后的第1、3、5、7、14、21d(T0～6)測(cè)定大鼠接種后肢的機(jī)械

2、縮足反射閾值和熱縮足反射潛伏期，采用免疫印跡法檢測(cè)各組大鼠脊髓CB2的表達(dá)水平，免疫熒光技術(shù)觀察CB2表達(dá)部位。
　　 第二部分：雌性SD大鼠24只，體重160～180g，隨機(jī)分為4組(n=6)：假手術(shù)組（Ⅰ組）、骨癌痛組（Ⅱ組）、骨癌痛+DMSO組（Ⅲ組）和骨癌痛+CB2選擇性拮抗劑AM630組（Ⅳ組）。在接種癌細(xì)胞后的第1、2及第3dⅢ組和Ⅳ組分別鞘內(nèi)注射DMSO0.15μl和溶于1％DMSO的AM63015μg。分別于接種

3、癌細(xì)胞前1d、接種后的第1、3、5、7、14、21d(T0～6)測(cè)定大鼠接種后肢的機(jī)械縮足反射閾值和熱縮足反射潛伏期。
　　 結(jié)果：(1)免疫印跡：與假手術(shù)組相比，骨癌痛7d組脊髓CB2表達(dá)顯著上調(diào)(P＜0.05)。(2)免疫熒光化學(xué)法：CB2主要表達(dá)于癌細(xì)胞接種后肢同側(cè)的脊髓背角的小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞。(3)疼痛行為學(xué)：與Ⅰ組相比，Ⅱ組和Ⅲ組的大鼠均在接種癌細(xì)胞后第7d接種后肢出現(xiàn)機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏(P＜0.05)；而Ⅳ組在接種

4、癌細(xì)胞后第1d接種后肢機(jī)械縮足反射閾值就顯著降低(P＜0.05)。各組大鼠接種后肢熱縮足反射潛伏期未見(jiàn)明顯的差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：1．脛骨癌痛模型大鼠脊髓CB2在早期表達(dá)明顯上調(diào)，鞘內(nèi)注射CB2選擇性拮抗劑AM630可使脛骨癌痛大鼠癌細(xì)胞接種后肢提前出現(xiàn)機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏。2．在骨癌痛形成過(guò)程中，CB2主要表達(dá)于接種后肢同側(cè)的脊髓背角的小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞，提示脊髓背角的膠質(zhì)細(xì)胞可能是CB2參與骨癌痛調(diào)控的主要途徑之