補體成分C3在腎小管上皮細胞表型轉(zhuǎn)化中的作用.pdf

1、目的：探討C3在腎小管上皮細胞表型轉(zhuǎn)化中的作用。 方法：(1)體外培養(yǎng)腎小管上皮細胞(HK-2)，將其分成對照組、50ng/ml IFN-γ組和50ng/ml TNF-α組。用RT-PCR法檢測HK-2細胞C3 mRNA的表達，Western Blot檢測C3蛋白質(zhì)的表達情況。(2) O.1μM C3a與HK-2細胞共培養(yǎng)24小時，用免疫熒光測定HK-2細胞α-SMA、E-cadherin的表達；(3)將HK-2細胞分成對照組、

2、C3a組、IFN-γ組和TNF-α組，RT-PCR法檢測α-SMA、E-cadherin mRNA的表達；Western Blot檢測α-SMA、E-cadherin蛋白的表達。 結(jié)果：(1)體外培養(yǎng)的腎小管上皮細胞可表達微量C3，分別加入50ng/ml IFN-γ和50ng/ml TNF-α后，腎小管上皮細胞C3 mRNA及蛋白質(zhì)的表達均明顯增加，與對照組比較有顯著差異(P<0.01)。(2)免疫熒光檢測顯示，正常腎小管上皮細

3、胞表達E-cadherin、而無α-SMA表達，經(jīng)O.1μM C3a刺激24小時，α-SMA表達顯著增加，E-cadherin表達明顯降低。(3).1μM C3a、50ng/ml IFN-γ和10ng/ml TNF-α與腎小管上皮細胞共培養(yǎng)24小時后，各組α-SMAmRNA表達均明顯增強，與對照組比較P<0.01，各組E-cadherinmRNA表達均顯著減少，與對照組比較差別有顯著意義，P<0.01； 結(jié)論：(1)體外培養(yǎng)的腎