左心室重構(gòu)大鼠模型的中醫(yī)證候?qū)W評(píng)價(jià)及其相關(guān)中藥的電生理作用研究.pdf

1、心律失常是嚴(yán)重威脅人類健康的心臟疾病，嚴(yán)重的心律失常已經(jīng)成為導(dǎo)致人類死亡的主要原因。而長(zhǎng)期以來(lái)，有效治療心律失常是中醫(yī)藥和中西醫(yī)結(jié)合臨床工作的薄弱環(huán)節(jié)。因此本研究致力于開(kāi)展中西醫(yī)結(jié)合防治心律失常的研究。 目的： 1．建立部分縮窄大鼠腹主動(dòng)脈致心室重構(gòu)動(dòng)物模型，并對(duì)該模型的中醫(yī)證候?qū)W進(jìn)行研究； 2．研究心室重構(gòu)大鼠模型的離體心臟電生理特點(diǎn)，并以應(yīng)用活血、益氣中藥的提取物為主進(jìn)行防治心室重構(gòu)致心律失常的藥理研究。

2、 方法： 1．用部分縮窄大鼠腹主動(dòng)脈的方法，復(fù)制大鼠心室重構(gòu)的動(dòng)物模型。應(yīng)用超聲心動(dòng)技術(shù)和病理實(shí)驗(yàn)技術(shù)(對(duì)模型大鼠心臟常規(guī)石蠟切片，分別行HE染色和Masson染色，顯微圖象觀察分析)的方法，對(duì)造模后第4周和第8周的大鼠心臟進(jìn)行病理學(xué)評(píng)價(jià)。以中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)的虛證、血瘀證辨證標(biāo)準(zhǔn)作為動(dòng)物模型的辨證依據(jù)，采集動(dòng)物模型的外在表觀信息和心功能評(píng)價(jià)等內(nèi)容、將臨床定性的問(wèn)診內(nèi)容替代以同等意義的實(shí)驗(yàn)測(cè)試指標(biāo)，包括左心室射血分值、心電圖ST

3、段改變、力竭性游泳時(shí)間等，開(kāi)展病證動(dòng)物模型的綜合評(píng)價(jià)。 2．用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈致心肌梗死的方法和按方法 復(fù)制兩種心室重構(gòu)的大鼠動(dòng)物模型。應(yīng)用Langdorff灌注大鼠離體心臟的電生理實(shí)驗(yàn)的方法分別觀察造模后第8周兩種心室重構(gòu)大鼠離體心臟的電生理指標(biāo)，包括：動(dòng)作電位復(fù)極20％的時(shí)間(APD<,20>，ms)，動(dòng)作電位復(fù)極50％的時(shí)間(APD<,50>，ms)，動(dòng)作電位復(fù)極90％的時(shí)間(APD<,90>,ms)，ERP/AP

4、D<,90>。比值，有效不應(yīng)期(ERP，ms)，動(dòng)作電位最大幅度(APA，mv)，零相上升的最大速率(Vmax，v/s)，APD<,90>。離散度，ERP 離散度。研究它們各自的電生理特點(diǎn)，比較它們之間電生理特點(diǎn)的異同。 3．按上述灌注離體心臟的電生理實(shí)驗(yàn)方法，以經(jīng)典的抗心律失常西藥利多卡因、胺碘酮、維拉帕米為陽(yáng)性對(duì)照藥，研究益氣、活血、清熱中藥的提取物，人參莖葉皂苷、川芎嗪、人參莖葉皂苷+川芎嗪、槐定堿、小檗堿對(duì)部分縮窄大鼠腹

5、主動(dòng)脈致心室重構(gòu)動(dòng)物模型的離體心臟電生理的影響。 4．按上述灌注離體心臟的電生理實(shí)驗(yàn)方法，研究扶正化瘀膠囊(0.4g/kg體重)和卡托普利(2.2mg/kg體重)對(duì)結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈模型灌胃8周后的離體心臟電生理作用。 結(jié)果： 1．造模后第4周，部分縮窄大鼠腹主動(dòng)脈致心室重構(gòu)大鼠心臟，室間隔舒張末期厚度(IVSTd)增厚、左室重量指數(shù)(LVMI)增大、左室壁厚度增加、左室腔面積增大、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)、心臟

6、血管周圍膠原面積比值(PVCA)增大、ST段發(fā)生缺血性變化導(dǎo)聯(lián)增加，以上超聲、病理、心電圖指標(biāo)與假手術(shù)組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)，心率增快(P<0.05)；力竭游泳時(shí)間縮短(P<0.01)。造模后第8周，IVSTd仍非常增加、左室后壁舒張末期厚度(LVPWTd)增加，左室壁厚度增大，心肌CVF、心臟PVCA增大，ST段發(fā)生缺血性變化導(dǎo)聯(lián)增加，以上超聲、病理、心電圖指標(biāo)與假手術(shù)組比較均有非常顯著性差異(P<0.01)，左室舒

7、張末期內(nèi)徑(LVDd)增加(P<0.05)，左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)減小(P<0.05)：LVMI增大(P<0.01)，左室腔面積增大(P<0.05)，心率增快(P<0.05)；力竭性游泳時(shí)間縮短(P<0.01)，以上數(shù)值與8周假手術(shù)組比較，均有顯著性差異。 2．造模后第8周，部分縮窄大鼠腹主動(dòng)脈致心室重構(gòu)大鼠離體心臟左心室動(dòng)作電位復(fù)極20％(APD<,20>)、動(dòng)作電位復(fù)極50％(APD<,50>。)、動(dòng)作電位復(fù)極90％(AP

8、D<,90>)均非常顯著延長(zhǎng)(P<0.01)、有效不應(yīng)期(ERP)有顯著延長(zhǎng)(P<0.05)、ERP/APDg，比值顯著減小(P<0.05)，右心室APD<,20>、APD<,50>、APD<,90>、ERP、ERP/APD<,90>比值無(wú)明顯變化，APD<,90>離散度、ERP 離散度非常顯著增大(P<0.01)。 結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈致心室重構(gòu)大鼠離體心臟左心室APD<,20>、APD<,50>、APD<,90>、ERP均非常顯

9、著延長(zhǎng)、ERP/APD<,90>。比值非常顯著減小，右心室APD<,20>、APD<,50>、APD<,90>ERF，均非常顯著延長(zhǎng)，ERP/APD<,90>比值非常顯著減小，APD<,90>離散度、ERP離散度非常顯著增大。以上各指標(biāo)均與假手術(shù)組相應(yīng)各指標(biāo)比較有非常顯著性差異(P<0.01)。 3．各藥對(duì)部分縮窄大鼠腹主動(dòng)脈致心室重構(gòu)大鼠離體心臟的電生理影響： (1)利多卡因：縮短心肌APD<,90>時(shí)程、增加ERP/

10、APD<,90>。比值，減小心肌動(dòng)作電位復(fù)極離散度，減小APA、Vmax。 (2)胺碘酮：延長(zhǎng)心肌APD<,90>、ERP時(shí)程、增加ERP/APD<,90>比值；減小心肌動(dòng)作電位和有效不應(yīng)期的離散度，延長(zhǎng)A—H時(shí)長(zhǎng)，減慢房室結(jié)傳導(dǎo)速度。 (3)維拉帕米：延長(zhǎng)心肌A—H時(shí)長(zhǎng)，對(duì)于該模型的動(dòng)作電位振幅(APA)、動(dòng)作電位上升最大速率(Vmax)、時(shí)程、均無(wú)影響，對(duì)室性心律失常作用有限。 (4)人參莖葉皂苷：A—H延長(zhǎng)

11、(P<0.01)。(5)川芎嗪：ERP延長(zhǎng)(P<0.05)，ERP/APD<,90>。比值增大(P<0.05)，A—H延長(zhǎng)(P<0.01)。(6)人參莖葉皂苷+川芎嗪：APD<,90>、ERP延長(zhǎng)(P<0.05)，ERP/APD<,90>比值增大(P<0.05)，A—H延長(zhǎng)(P<0.01)。(7)槐定堿：APD<,90>、ERF 延長(zhǎng)(P<0.05)，ERP/APD<,90>比值增大(P<0.05)，A—H、H—V間期延長(zhǎng)(P<0.01

12、)。(8)小檗堿APD<,90>、ERP延長(zhǎng)(P<0.05)，ERP/APD<,90>。比值增力口(P<0.05)，APA和Vmax減小、(P<0.01)，A—H、H—V間期均延長(zhǎng)(P<0.01)。 4．卡托普利和扶正化瘀膠囊對(duì)結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈致心室重構(gòu)模型的離體心臟電生理的影響： (1)卡托普利：原已增大的心肌APD<,90>減小(P<0.05)，原己減小的ERP/APD<,90>，比值增大(P<0.05)，APD<,

13、90>。離散度減小，致室顫的烏頭堿用藥量增大(P<0.05)。 (2)扶正化瘀膠囊：原已增大的APD<,90>。減小(P<0.05)，原已減小的ERP/APD<,90>比值增大(P<0.05)，致室顫的烏頭堿用藥量增大(P<0.05)。 結(jié)論： 1．部分縮窄大鼠腹主動(dòng)脈致心室重構(gòu)模型大鼠心臟，具有早期呈現(xiàn)典型的向心性肥厚的病理改變，以后發(fā)展為向心性肥厚又有離心性肥厚的混合型左室肥厚的動(dòng)態(tài)改變。中醫(yī)證候表現(xiàn)為氣虛、

14、血瘀證候的特點(diǎn)。 2．兩種心室重構(gòu)大鼠離體心臟的電生理特性各有其不同的特點(diǎn)。部分縮窄腹主動(dòng)脈致心室重構(gòu)大鼠離體心臟左心室APD、ERP 延長(zhǎng)，右心室APD、ERP無(wú)改變。心梗后心室重構(gòu)大鼠離體心臟左心室APD、ERP延長(zhǎng)更加明顯，右心室APD和ERP也明顯延長(zhǎng)。 3．人參莖葉皂苷加川芎嗪合用后對(duì)心肌電生理的影響比單用人參莖葉皂苷和川芎嗪全面，具體是：既延長(zhǎng)心肌APD<,90>、ERP，又增加了ERP/APD<,90>比值

15、，同時(shí)也具有延長(zhǎng)A—H時(shí)長(zhǎng)；增加冠脈流量的作用。對(duì)于改善心肌APD<,90>、ERP、ERP/APD<,90>比值，增加冠脈流量的強(qiáng)度大于單獨(dú)應(yīng)用人參莖葉皂苷或川芎嗪。 槐定堿能夠顯著延長(zhǎng)心肌APD<,90>、ERP，增加ERP/APD<,90>比值，延長(zhǎng)A—H時(shí)長(zhǎng)，H—V時(shí)長(zhǎng)等抗心律失常作用，但有顯著減少了心室重構(gòu)大鼠離體心臟冠脈流量的作用。 小檗堿延長(zhǎng)心肌APD<,90>、ERP，增加ERP/APD<,90>比值，延