《傷寒倫》溫陽(yáng)三方干預(yù)心梗后心衰心陽(yáng)虛證候大鼠心室重構(gòu)的比較研究.pdf

1、慢性心力衰竭是多種心血管疾病的最后歸宿和主要死亡原因，心室重構(gòu)是導(dǎo)致心衰發(fā)生的基本機(jī)制。近年來(lái)隨著溶栓及介入技術(shù)的發(fā)展，心梗后心衰患者比例明顯上升。
　　 中醫(yī)在治療心衰等疾病的歷史中留下了大量的有效方劑。但此類(lèi)方劑數(shù)量龐大、治法不同、配伍靈活，需辨證論治，為臨床選方用藥造成了一定困難。方劑研究的核心問(wèn)題是方劑配伍規(guī)律和方證關(guān)系，這也是現(xiàn)代中醫(yī)藥研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)疾病研究的深入和中西醫(yī)結(jié)合研究的進(jìn)展，越來(lái)越多學(xué)者贊

2、同，在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，西醫(yī)辨病與中醫(yī)辨證相結(jié)合，借助現(xiàn)代醫(yī)療檢測(cè)手段及理論等病證結(jié)合的診療研究模式是目前較為成熟的中西醫(yī)結(jié)合模式。病證結(jié)合的中醫(yī)證候模型是中西醫(yī)結(jié)合研究的較為合適的切入點(diǎn)。
　　 目的：
　　 1.文獻(xiàn)研究從源到流梳理溫陽(yáng)法(方)治療心力衰竭的研究概況。
　　 2.實(shí)驗(yàn)研究從病名診斷、證候及病理演變比較經(jīng)典著作《傷寒論》中溫陽(yáng)三方對(duì)心梗后心衰心陽(yáng)虛證候模型大鼠在一般情況、相關(guān)癥狀、心功能及心室重

3、構(gòu)等方面的治療效果。
　　 3.從分子、基因水平觀察促纖維化重要分子TGF-β及其與相關(guān)因子ACT-A、AngⅡ的相互作用，從而探討溫陽(yáng)法(方)治療心梗后心衰心陽(yáng)虛證候大鼠的機(jī)制與實(shí)質(zhì)。
　　 4.通過(guò)以方測(cè)證對(duì)心梗后心衰心陽(yáng)虛證候模型大鼠進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　 5.通過(guò)不同溫陽(yáng)方對(duì)心梗后心衰心陽(yáng)虛證候模型大鼠不同療效的比較，探討方證相關(guān)性與方劑療效的關(guān)系。
　　 方法：
　　 1.用手術(shù)冠脈左前降支結(jié)

4、扎后第9—12周加用左旋硝基精氨酸(L-NNA)腹腔注射的聯(lián)合造模方法制作心梗后心衰心陽(yáng)虛證候大鼠，參照西醫(yī)心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行疾病評(píng)價(jià)；以臨床心陽(yáng)虛辨證標(biāo)準(zhǔn)，參考心氣虛標(biāo)準(zhǔn)，作為動(dòng)物模型的中醫(yī)辨證依據(jù)，收集動(dòng)物客觀指標(biāo)(心功能、心率、體溫、力竭游泳時(shí)間等)，對(duì)該模型進(jìn)行中醫(yī)證候分析。
　　 2.對(duì)上述證候模型大鼠在術(shù)后9—12周分別予桂甘龍牡湯、苓桂術(shù)甘湯、真武湯每日灌胃治療，對(duì)其進(jìn)行：
　　 (1)證候相關(guān)指標(biāo)及心功

5、能、血流動(dòng)力學(xué)、心指數(shù)變化等指標(biāo)的收集，觀察溫陽(yáng)三方對(duì)上述證候大鼠疾病與證候干預(yù)治療的作用。
　　 (2)B超、血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)、心指數(shù)等心室重構(gòu)相關(guān)指標(biāo)收集，HE染色進(jìn)行病理學(xué)形態(tài)觀察，Masson染色法進(jìn)行膠原染色觀察膠原沉積情況，從而觀察溫陽(yáng)三方對(duì)上述證候模型大鼠心室重構(gòu)的影響。
　　 (3)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)觀察溫陽(yáng)三方對(duì)上述證候模型大鼠血清中ACT-A、AngⅡ、TGF-β1含量，免疫組化法觀察溫陽(yáng)三方

6、對(duì)模型大鼠局部心肌組織中ACT-A、AngⅡ、TGF-β1表達(dá)的影響，從而觀察溫陽(yáng)三方對(duì)該TGF-β1與相關(guān)作用因子蛋白含量的影響。
　　 (4)逆轉(zhuǎn)錄-聚合式酶聯(lián)反應(yīng)(RT-PCR)法觀察各組大鼠心肌組織中ACT-A、AngⅡ、TGF-β1 mRNA含量的影響，從基因水平探討溫陽(yáng)三方對(duì)上述證候模型大鼠治療的機(jī)制。
　　 結(jié)果：
　　 1.與假手術(shù)組相比，模型組大鼠全身一般情況較差，心率增快，體溫降低，夜尿增加，

7、力竭游泳時(shí)間減少，心功能評(píng)價(jià)降低，血流動(dòng)力學(xué)±dp/dtmax、LVSP下降、LVEDP上升，心臟指數(shù)及左室指數(shù)明顯上升，符合中西醫(yī)關(guān)于心力衰竭及心陽(yáng)虛證的診斷標(biāo)準(zhǔn)，說(shuō)明造?；境晒Α?br>　　 2.與模型組相比，溫陽(yáng)三方治療組在一般情況，中醫(yī)證候指標(biāo)、心功能、血流動(dòng)力學(xué)及左室指數(shù)上有所好轉(zhuǎn)，其中真武湯、苓桂術(shù)甘湯療效較佳，桂甘龍牡湯效果次之；存活率方面以苓桂術(shù)甘湯為佳，真武湯、桂甘龍牡湯效果較弱。
　　 3.與模型組相比，

8、溫陽(yáng)三方治療組對(duì)室間隔IVS、E峰、E/A比、LVIDd有不同程度改善作用(P<0.01或0.05)，苓桂術(shù)甘湯、真武湯能明顯降低LVIDs、提高SV(P<0.01或0.05)，真武湯能提高EF和FS(P<0.05)；苓桂術(shù)甘湯、真武湯能明顯降低心指數(shù)，真武湯還能顯著降低左室指數(shù)。在病理學(xué)變化和膠原纖維沉積方面的變化，苓桂術(shù)甘湯、真武湯療效較好，三方療效按桂甘龍牡湯、苓桂術(shù)甘湯、真武湯依次遞增。
　　 4.苓桂術(shù)甘湯、真武湯能使

9、模型大鼠血清中ACT-A、AngⅡ、TGF-β1含量降低，使心肌局部組織中ACT-A、AngⅡ、TGF-β1表達(dá)含量減少，三方療效按桂甘龍牡湯、苓桂術(shù)甘湯、真武湯依次遞增。
　　 5.《傷寒論》溫陽(yáng)方主要通過(guò)下調(diào)ACT-A、TGF-β1 mRNA基因，上調(diào)AT2 mRNA的表達(dá)以達(dá)到治療作用。桂苓術(shù)甘湯、真武湯的治療作用較桂甘龍牡湯明顯。除在ACT-A mRNA上桂苓術(shù)甘湯、真武湯兩組在統(tǒng)計(jì)上無(wú)明顯差異外，真武湯組AT2、TGF

10、-β1 mRNA與苓桂術(shù)甘湯組相比均差異明顯(P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.《傷寒論》溫陽(yáng)三方中改善各項(xiàng)數(shù)據(jù)指標(biāo)(心率、體溫、尿量、力竭游泳時(shí)間、心功能、血流動(dòng)力學(xué)、心指數(shù))療效最優(yōu)者多為真武湯，但結(jié)合遠(yuǎn)期生存率，綜合考慮療效最佳者為苓桂術(shù)甘湯。
　　 2.《傷寒論》溫陽(yáng)方治療心梗后心衰心陽(yáng)虛證，抑制心室重構(gòu)，主要是通過(guò)下調(diào)組織中升高的ACT-A、TGF-β1 mRNA，降低ACT-A、TGF-β1表

11、達(dá)；繼續(xù)上調(diào)AT2 mRNA，抑制AngⅡ生成和作用而實(shí)現(xiàn)的，這也是溫陽(yáng)方治療心衰陽(yáng)虛證的作用靶點(diǎn)和物質(zhì)基礎(chǔ)之一。
　　 3.溫陽(yáng)三方中真武湯偏重于改善心室收縮功能；苓桂術(shù)甘湯偏重于改善膠原沉積，抑制心室重構(gòu)而提高生存率；桂甘龍牡湯對(duì)部分左室形態(tài)學(xué)指標(biāo)心功能(E峰、A峰、E/A比)、膠原沉積、心室重構(gòu)，降低AngⅡ、TGF-β1表達(dá)有一定改善作用。
　　 4.三方中苓桂術(shù)甘湯與模型大鼠方證相應(yīng)程度最高，故總體療效最佳；也