紅景天苷及心復(fù)力顆粒對(duì)大鼠急性心梗后心室重構(gòu)心肌纖維化作用及機(jī)制研究.pdf

1、本文主要從以下幾方面進(jìn)行討論：
　　第一部分 紅景天苷對(duì)大鼠急性心梗后心室重構(gòu)心肌纖維化相關(guān)作用及機(jī)制研究
　　目的:觀察評(píng)價(jià)長(zhǎng)期應(yīng)用不同劑量紅景天苷對(duì)急性心梗大鼠心室重構(gòu)相關(guān)作用及機(jī)制
　　方法:建立結(jié)扎SD大鼠左前降支冠脈造急性心梗的模型，隨機(jī)分為6組:紅景天苷低、中、高劑量組(MI+SALL，MI+SALM，MI+SALH)，卡維地洛對(duì)照組(MI+CAVE)，模型組(MI)，假手術(shù)組(Sham)。灌胃給藥干預(yù)56

2、天后超聲評(píng)價(jià)監(jiān)測(cè)心功能變化、計(jì)算左心室重量指數(shù)(LVW/BW)和全心重量指數(shù)(HW/BW)，測(cè)量左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，左室縮短率(LVFS)、左心室收縮期內(nèi)徑(LVIDS);取梗死周邊心肌組織，利用HE染色，Masson染色，天狼星紅染色分別觀察心肌組織病理生理學(xué)改變及心肌纖維化面積、非梗死區(qū)Ⅰ/Ⅲ型膠原比值;利用Westernblot和Realtime-PCR分析檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路關(guān)鍵的信號(hào)分子DVL-1和β-

3、catenin蛋白及其mRNA的表達(dá)，整理數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:與Sham組比較，MI組LVEF、LVFS值明顯下降(P＜0.01)，LVIDS上升、HW/BW值較高(P＜0.05)，LVW/BW值則處于低水平(P＜0.01);灌胃后各組大鼠心肌梗死區(qū)域室壁總體變薄，HE染色結(jié)果顯示左室病理生理學(xué)改變顯著，Masson染色結(jié)果顯示梗死周邊區(qū)心肌膠原纖維明顯增多，纖維瘢痕形成，心肌膠原面積較大，天狼星紅染色結(jié)果顯示有明顯Ⅰ、Ⅲ型

4、膠原的沉積;梗死周邊區(qū)Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路中的關(guān)鍵性信號(hào)蛋白DVL-1和β-catenin及其mRNA呈現(xiàn)高表達(dá)水平(P＜0.05）。與MI組比較，各治療組可見(jiàn)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維組織增生，肌原纖維溶解;其中MI+SALM組LVEF和LVFS、LVW/BW值上升，Ⅰ/Ⅲ型膠原比值下降(P＜0.05)，MI+SALL組和MI+CAVE組心肌膠原面積、Ⅰ/Ⅲ型膠原比值明顯下調(diào)(P＜0.01)， LVEF和LVFS、LVW/

5、BW值明顯升高(P＜0.01)，DVL-1和β-catenin的表達(dá)水平均明顯下降(P＜0.01，P＜0.05)。兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。MI+SALH組心肌膠原面積有一定程度減小(P＜0.05)。各組體重變化及HW/BW值均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:長(zhǎng)期治療干預(yù)下，應(yīng)用小劑量的紅景天苷優(yōu)于中高劑量，能顯著改善實(shí)驗(yàn)大鼠急性心梗后心室重構(gòu)，抑制心肌纖維化。這一機(jī)制可能與其參與調(diào)控Wnt/β-catenin

6、信號(hào)通路傳導(dǎo)有關(guān)。
　　第二部分 心復(fù)力顆粒對(duì)于急性心梗大鼠心室重構(gòu)心肌纖維化的作用和相關(guān)機(jī)制
　　目的:觀察評(píng)價(jià)長(zhǎng)期應(yīng)用不同劑量心復(fù)力顆粒(XG）對(duì)急性心梗大鼠心室重構(gòu)相關(guān)作用及機(jī)制。
　　方法:建立結(jié)扎SD大鼠左前降支冠脈造急性心梗的模型，隨機(jī)分為6組:心復(fù)力顆粒中劑量組(MI+XGM)、心復(fù)力顆粒高劑量組(MI+XGH)，卡維地洛對(duì)照組(MI+C)，心復(fù)力顆粒中+卡維地洛組(MI+C+XGM)，假手術(shù)組(Sham

7、)，模型組(MI)。灌胃給藥干預(yù)56天后超聲評(píng)價(jià)監(jiān)測(cè)心功能變化、計(jì)算左心室重量指數(shù)(LVW/BW)和全心重量指數(shù)(HW/BW)，測(cè)量左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，左室縮短率(LVFS)、左心室收縮期內(nèi)徑(LVIDS);取梗死周邊心肌組織，利用HE染色，Masson染色，天狼星紅染色分別觀察心肌組織病理生理學(xué)改變及心肌纖維化面積、非梗死區(qū)Ⅰ/Ⅲ型膠原比值;利用Western blot和Realtime-PCR分析檢測(cè)TGF-β/Smads信號(hào)

8、通路關(guān)鍵的信號(hào)分子Smad3、P-Smad3、Smad2、Smad7蛋白及其mRNA的表達(dá)，免疫組化和免疫熒光觀察其中關(guān)鍵分子Smad3的表達(dá)情況，整理數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:灌胃后各組大鼠心肌梗死區(qū)域室壁總體變薄，與Sham組比較，MI組HE染色結(jié)果顯示左室病理生理學(xué)改變顯著， Masson染色結(jié)果顯示梗死周邊區(qū)心肌膠原纖維明顯增多，纖維瘢痕形成，心肌膠原面積較大，天狼星紅染色結(jié)果顯示有明顯Ⅰ、Ⅲ型膠原的沉積， LVEF、LV

9、FS值明顯下降(P＜0.01），LVIDS上升、HW/BW值較高(P＜0.05)，LVW/BW值則處于低水平(P＜0.01);梗死周邊區(qū)TGF-β/Smads信號(hào)通路關(guān)鍵的信號(hào)分子Smad3、P-Smad3、Smad2及其mRNA呈現(xiàn)高表達(dá)水平(P＜0.05)，Smad7及其mRNA表達(dá)低水平(P＜0.05)。與MI組比較，各治療組可見(jiàn)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維組織增生，肌原纖維溶解;各治療組均有明顯Ⅰ、Ⅲ型膠原的沉積，各組LVEF值均有不同

10、程度上升;其中MI+XGM組LVIDS值有明顯降低(P＞0.01)，HW/BW有所降低(P＜0.05); MI+XGH組LVW/BW值有升高(P＜0.05)，心肌膠原明顯減少(P＜0.01); MI+C組LVFS值方面明顯升高(P＜0.01)，LVW/BW值明顯升高(P＜0.01)。心肌膠原明顯減少(P＜0.01）。心肌膠原面積減小，Ⅰ/Ⅲ型膠原比值下降(P＜0.01); MI+C+XGM組HW/BW有所降低(P＜0.05)，心肌膠原面

11、積有一定程度減少(P＜0.05);各組體重變化及HW/BW值均無(wú)顯著差異(P＞0.05)。各組TGF-β/Smads通路關(guān)鍵的信號(hào)分子Smad3、P-Smad3、Smad2蛋白的表達(dá)均有不同水平下調(diào)，Smad7表達(dá)升高(P＜0.01)，免疫組織化學(xué)染色和免疫熒光分別驗(yàn)證各組Smad3的表達(dá)結(jié)果，與Western blot大體一致。
　　結(jié)論:XG能顯著改善實(shí)驗(yàn)大鼠急性心梗后心室重構(gòu)，抑制心肌纖維化。這一機(jī)制可能與其參與調(diào)控TGF-