丹皮酚抑制大鼠心梗后心室重構(gòu)及對RAS的影響.pdf

1、目的：
　　結(jié)扎大鼠左冠狀動脈前降支建立大鼠心肌梗死模型。采用HE染色法和Masson染色觀察丹皮酚對心肌梗死（Myocardial Infarction,MI）后心室重構(gòu)模型大鼠心肌病變組織一般形態(tài)結(jié)構(gòu)改變及其組織纖維化程度的影響；采用Real-Time PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)方法，從基因和蛋白水平觀察丹皮酚對 MI后心室重構(gòu)模型大鼠腎素-血管緊張素系統(tǒng)（Renin-Angiotensin System,RAS）的

2、影響，探討丹皮酚對大鼠MI后心室重構(gòu)抑制作用的分子機(jī)制。
　　方法：
　　1.結(jié)扎大鼠左冠狀動脈前降支，復(fù)制心肌梗死模型
　　2.采用HE染色法檢測各組大鼠心肌組織的病理改變
　　3.采用Masson染色法觀察各組大鼠心肌纖維化程度
　　4.Real-Time PCR檢測各組大鼠心肌組織血管緊張素原（Angiotensinogen，AGT）、血管緊張素Ⅱ受體1（AngiotensinⅡreceptor ty

3、pe1,AGTR1）、內(nèi)皮素-1（Endothelin-1,ET-1） mRNA表達(dá)水平
　　5.Western blot檢測各組大鼠心肌組織血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ,Ang-Ⅱ）、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（Angiotensin-converting enzyme,ACE）、AGTR1蛋白表達(dá)水平
　　結(jié)果：
　　1.結(jié)扎大鼠左冠狀動脈前降支，其結(jié)扎線下心肌顏色變白；心電圖ST段弓背抬高顯著。
　　2.

4、HE染色結(jié)果顯示：假手術(shù)組心肌組織橫紋清晰、排列規(guī)則且完整，細(xì)胞質(zhì)均勻豐富，細(xì)胞核清晰可見；與假手術(shù)組比較，模型組心肌細(xì)胞出現(xiàn)排列紊亂、代償性肥大、部分細(xì)胞核缺失現(xiàn)象，心肌纖維斷裂嚴(yán)重；與模型組相比，丹皮酚低、中、高劑量組和卡托普利組在不同程度上改善了心肌組織病理狀態(tài)，其作用效果介于假手術(shù)組與模型組之間。其中，丹皮酚高劑量組作用效果最佳，與卡托普利組相當(dāng)。
　　3.Masson染色結(jié)果顯示：假手術(shù)組心肌組織無斷裂現(xiàn)象，心肌細(xì)胞排列

5、緊密、規(guī)則；與假手術(shù)組對比，模型組大鼠心肌組織中膠原纖維明顯增多，取代了正常心肌組織，破壞了心肌組織正常結(jié)構(gòu)；與模型組對比，丹皮酚低、中、高劑量組及卡托普利組的藍(lán)染膠原纖維范圍縮小，心肌纖維化程度減輕，心肌纖維斷裂情況有所好轉(zhuǎn)。其作用效果介于假手術(shù)組與模型組之間，其中丹皮酚高劑量組作用效果最佳，與卡托普利組相當(dāng)。
　　4.Real-Time PCR檢測結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，大鼠模型組心肌組織中AGT、AGTR1和ET-1mRN

6、A表達(dá)均顯著升高（P<0.01）。與模型組比較，丹皮酚高劑量組和卡托普利組心肌組織中AGT、AGTR1和ET-1mRNA表達(dá)均顯著降低（P<0.01）；丹皮酚中劑量組心肌組織中AGT mRNA表達(dá)顯著降低（P<0.01），AGTR1 mRNA表達(dá)有所下降（P<0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義，ET1 mRNA表達(dá)無明顯降低，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；丹皮酚低劑量組心肌組織中，除 AGTmRNA表達(dá)顯著降低（P<0.01）外，AGTR

7、1和ET-1mRNA表達(dá)均無明顯下降，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　5.Western blot檢測結(jié)果顯示：與假手術(shù)組比較，大鼠模型組心肌組織中AGTR1、Ang-Ⅱ和ACE的蛋白表達(dá)量均顯著升高（P<0.01），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。與模型組比較，丹皮酚低劑量組AGTR1表達(dá)無明顯變化，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），Ang-Ⅱ和ACE有所下降，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；丹皮酚中、高劑量組和卡托普利組中，

8、三種蛋白表達(dá)量均顯著降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.大鼠MI后，心肌纖維化，心室發(fā)生重構(gòu)。丹皮酚通過抑制心肌纖維化，改善大鼠心室重構(gòu)。
　　2.丹皮酚可能是通過下調(diào)AGT mRNA的表達(dá)、ACE蛋白水平的表達(dá)量，進(jìn)而降低Ang-Ⅱ和ET-1的水平，抑制RAS的過度激活，逆轉(zhuǎn)心肌梗死后大鼠心室重構(gòu)。
　　3.丹皮酚可能是通過抑制AGTR1表達(dá)，減少Ang-Ⅱ與AGTR1的結(jié)合，從而阻