納米材料承載ephrin-b2-Fc對心梗大鼠心室電生理的影響.pdf

1、目的:交感神經(jīng)萌發(fā)是促成心梗后惡性心律失常發(fā)生的重要原因,由于具體機制未明,關(guān)于如何改善交感神經(jīng)重構(gòu)以減少心源性猝死(sudden cardiac death,SCD)的發(fā)生研究甚少。神經(jīng)生長誘導信號分子Ephrin-b2可通過接觸抑制及誘導生長錐塌陷的方式調(diào)控神經(jīng)的生長,在胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及成體神經(jīng)損傷中扮演重要角色。本課題將ephrin-b2調(diào)控神經(jīng)生長的特性引入心梗調(diào)節(jié)神經(jīng)萌發(fā)的研究,試圖探索一條能否通過直接抑制神經(jīng)重構(gòu)以改善室

2、性心律失常發(fā)生的治療思路。因?qū)π墓５闹委熑鄙俪休d藥物釋放的載體,無法穩(wěn)定持久地釋放藥物而讓研究的效果受限。得益于自聚肽(Self-assembling peptide,SAP)這類組織工程學材料的廣泛應用,我們意圖利用SAP承載ephrin-b2蛋白的緩釋效應,研究ephrin-b2蛋白治療心梗后心律失常的可行性。
　　方法:1、分別在心梗后的大鼠心肌組織內(nèi)注射Ephrin-b2/Fc蛋白(Egroup,n=25)和自聚肽Ephr

3、in-b2/Fc蛋白凝膠(ESgroup,n=25),在既設的時間點(1h,3h,24h,7d,14d)收集心肌組織和血清樣本各5個,用免疫熒光和免疫印跡檢技術(shù)檢測eprhin-b2蛋白駐留和丟失情況;2、構(gòu)建SD大鼠心梗模型,30分鐘后分別注射PBS(MIgroup,n=20),ephrin-b2/Fc重組蛋白(EFNgroup,n=20),自聚肽(SAPgroup,n=19),ephrin-b2/Fc與自聚肽凝膠混合液(EFN+SA

4、Pgroup,n=19),同時增設一假手術(shù)組(shamgroup,n=10)。2周后記錄II導聯(lián)體表心電圖,計算室性早搏(PVCs)數(shù),評估心律變異性(HRV);通過在體記錄心外膜單相動作電位(MAP)觀察梗死周邊局部心肌的90％單相動作電位時程(MAPD90)變化;通過程序電刺激(PES)測定心室有效不應期(VERP),室性心律失常(VAs)的誘發(fā)率以及室顫閾值(VFT)。3、通過免疫熒光染色觀察交感神經(jīng)纖維萌發(fā)情況并計算分布密度。<

5、br>　　結(jié)果:1、除注射后1h外,Ephrin-b2/Fc蛋白在ES組的駐留量明顯高于同期的E組;注射后早期(1h和3h),ES組Ephrin-b2/Fc的血液釋入量明顯低于同期的E組,中晚期(7d和14d)倆組無顯著差別;2、心梗2周后,與MI組比較,EFN組PVCs、MAPD90、VAs誘發(fā)積分有所減少,VFT有所提高,但除MAPD90有顯著差異外,余下各指標無統(tǒng)計學意義;而EFN+SAP組以上各心電指標存在顯著改變,且SAP組并

6、未影響心梗后電生理特性。各組ERP及HRV無統(tǒng)計學意義。3、TH陽性免疫熒光密度分布顯示MI組及SAP組較sham組分布密度顯著提高,EFN+SAP組比MI組顯著降低。
　　結(jié)論:Ephrin-b2/Fc可改善心梗后心律失常,其機制可能是通過抑制心梗后交感神經(jīng)重構(gòu)途徑實現(xiàn)的;且在自聚肽的承載下,其改善作用得到加強,可能是自聚肽延緩了ephrin-b2/Fc在心肌組織的釋放,提高了目的蛋白在局部的作用實效所致;單純自聚肽RAD16-