Notch1信號(hào)活化促進(jìn)腎癌細(xì)胞增殖的機(jī)制研究及NY-ESO-1-DC相互作用增敏全細(xì)胞腎癌疫苗的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)2013屆博士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10246學(xué)號(hào)：09111210046復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文Notchl信號(hào)活化促進(jìn)腎癌細(xì)胞增殖的機(jī)制研究及NYESO一1／DC相互作用增敏全細(xì)胞腎癌疫苗的實(shí)驗(yàn)研究院系：中山醫(yī)院專業(yè)：姓名：導(dǎo)師：寸歲：導(dǎo)師組成員：外科學(xué)許樂(lè)林宗明教授徐潔杰副研究員曾鋼副教授二零一三年四月復(fù)旦大學(xué)2013屆博士學(xué)位論文摘要第一部分：Notchl信號(hào)通過(guò)上調(diào)P13K／Akt通路活性促進(jìn)腎癌細(xì)胞增殖的分子機(jī)制研究目的No

2、tchl信號(hào)通路和P13K／Akt信號(hào)通路在腎透明細(xì)胞癌中過(guò)度活化，而且二者參與了腎癌的發(fā)生。本研究試圖證明Notchl信號(hào)通過(guò)上調(diào)P13K／Akt通路的活性而促進(jìn)腎癌細(xì)胞增殖這一假設(shè)。方法首先，為了明確腎透明細(xì)胞組織中Notchl信號(hào)通路的活性狀態(tài)，我們用Westernblot的方法檢測(cè)了16對(duì)新鮮腎癌和正常腎旁組織中：[aggedl配體、Notchl受體的活性片段(ICNI)和下游靶基因(Hesl)的蛋白水平。然后，我們?cè)谌昴I癌細(xì)

3、胞系和一株永生化的腎小管上皮細(xì)胞系中開展體外的機(jī)制和功能研究。我們用不同的方法上調(diào)或下調(diào)腎癌細(xì)胞中Notchl信號(hào)的活性后，用Westernblot的方法檢測(cè)Akt的磷酸化水平。為了進(jìn)一步分析Notchl和P13K／Akt信號(hào)通路對(duì)細(xì)胞增殖的影響，我們?cè)诓煌瑮l件下檢測(cè)了細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)。最后，我們用免疫組化的方法在組織芯片中驗(yàn)證體外實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。結(jié)果在腎透明細(xì)胞癌的臨床標(biāo)本和細(xì)胞系中都存在Notchl信號(hào)通路的過(guò)度