HDAC2在腎病綜合征患兒糖皮質(zhì)激素反應(yīng)差異性中的作用研究.pdf

1、目的：觀察不同糖皮質(zhì)激素(GC)反應(yīng)原發(fā)性腎病綜合征(PNS)患兒激素治療前后外周血淋巴細(xì)胞中組蛋白去乙?；?(histone deacetylase2，HDAC2)表達(dá)、活性及血清白介素8(IL-8)表達(dá)的差異，探討組蛋白去乙酰化狀態(tài)在PNS患兒GC耐藥中的作用及可能機(jī)制。
　　方法：選取2011年5月至2012年8月于徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門(mén)診及住院治療的初發(fā)NS患兒48例，根據(jù)隨訪結(jié)果，按照患兒對(duì)GC的療效分成兩組:GC敏感型

2、腎病綜合征(SSNS)25例，其中男13例，女12例，年齡3-12歲，平均（6.5±0.8）歲;GC耐藥型腎病綜合征(SRNS)23例，其中男15例，女8例，年齡3-12歲，平均（5.6±0.3）歲。另選20例健康兒童作為正常對(duì)照組，其中男13例，女7例，年齡5-14歲，平均（6.6±0.4）歲;分兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)采集外周血標(biāo)本:(1)初發(fā)病未用GC時(shí);(2)足量GC治療4周時(shí)。應(yīng)用密度梯度離心方法分離外周血淋巴細(xì)胞，分別以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)

3、(RT-PCR)和免疫蛋白印跡(Western-blot)方法檢測(cè)HDAC2mRNA及蛋白表達(dá)，雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)HDAC2的活性。用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)血清IL-8表達(dá)水平。
　　結(jié)果：正常對(duì)照組和各PNS組患兒外周血淋巴細(xì)胞均有HDAC2mRNA及蛋白表達(dá);GC治療前，SSNS組和SRNS組HDAC2 mRNA、蛋白相對(duì)表達(dá)量及活性低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.

4、01); SRNS組HDAC2 mRNA、蛋白相對(duì)表達(dá)量及活性（0.60±0.13;0.45±0.13;28.25±1.20）明顯低于SSNS組（0.72±0.10;0.60±0.11;32.30±1.42），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01); GC治療4周時(shí)，SRNS組HDAC2mRNA、蛋白相對(duì)表達(dá)量及活性（0.58±0.12;0.42±0.08;24.52±1.35）低于SSNS組（0.76±0.15;0.68±0.06;37.5

5、3±1.11）及正常對(duì)照組（0.81±0.12;0.70±0.05;38.63±1.50），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01); SSNS組HDAC2mRNA、蛋白表達(dá)量及活性高于GC治療前(P＜0.05)，低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01); SRNS組HDAC2mRNA、蛋白表達(dá)量及活性均低于GC治療前，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。PNS患兒外周血清IL-8表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組(79.59±4.13)，GC

6、治療前后SRNS組IL-8表達(dá)（125.48±2.78;128.33±1.11）高于SSNS組（102.40±3.84;85.67±2.83），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。PNS患兒GC治療前后外周淋巴細(xì)胞中HDAC2mRNA、蛋白的相對(duì)表達(dá)及活性與血清IL-8表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.89、r=-0.91、r=-0.92），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　結(jié)論：不同GC反應(yīng)PNS患兒HDAC2表達(dá)及活性有差異;H