酰基輔酶A：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶2在2型糖尿病血脂異常中作用機(jī)制的研究.pdf

1、2型糖尿病越來越多的伴隨有冠心病的發(fā)生，然而糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化之間的關(guān)系至今還未完全明了。通常糖尿病伴發(fā)代謝紊亂為血漿脂蛋白生成和清除異常。此外，血脂代謝異常的出現(xiàn)也是糖尿病發(fā)生的先兆。糖尿病血脂異常以低HDL，TG、小而密的LDL和餐后脂血增高為特征。這種血脂改變是繼發(fā)冠心病的主要風(fēng)險(xiǎn)因素。因此本文將重點(diǎn)討論糖尿病發(fā)生血脂變化的相關(guān)機(jī)制。 第一部分 重慶地區(qū)NGT、IGR、糖尿病血脂異常的特征 目的：比較正常

2、糖代謝(NGT)、糖調(diào)節(jié)受損(IGR)、糖尿病(DM)等三組人群中血脂代謝的特點(diǎn)。 方法：采用橫斷面分析的方法，對(duì)重慶地區(qū)21～89歲人群進(jìn)行調(diào)查，根據(jù)口服糖耐量試驗(yàn)(OGTT)結(jié)果，將調(diào)查人群分為正常糖代謝(NGT)、糖調(diào)節(jié)受損(IGR)、糖尿病(DM)三組，分別比較各組間及每組男女間的血脂代謝狀況。 結(jié)果：NGT、IGR和DM組，TG、TC、LDL-C水平依次遞增，而HDL-c水平則呈遞減趨勢(shì)。NGT組中男性高TG患

3、病率顯著高于女性(P<0．01)，IGR組中女性高TG患病率則明顯高于男性(P<0．01)，在DM組中男女間高TG患病率無明顯差別(P>0．05)；在各組中女性的高TC患病率均高于男性(P<0．01)。 結(jié)論：重慶地區(qū)人群血脂異常以高TG、TC、LDL-C為主，而IGR和DM人群中女性高TC患病率較男性更突出。 第二部分 ?；o酶A：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶2 基因多態(tài)性與2型糖尿病血脂異常的關(guān)系

4、 目的：探討中國重慶地區(qū)2型糖尿病和非糖尿病人群酰基輔酶A：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶2(ACAT2)基因第7外顯子734C／T多態(tài)性與2型糖尿病血脂異常的關(guān)系。 方法：選取132例非糖尿病患者，153例2型糖尿病患者，測(cè)量空腹血糖、胰島素、總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇，采用聚合酶鏈反應(yīng)一限制性內(nèi)切酶長度多態(tài)性技術(shù)(PCR-RFLP)分析ACAT2734C／T基因型。 結(jié)果：ACAT2基因型分布和等位

5、基因頻率在非糖尿病和2型糖尿病之間有顯著差異，非糖尿病組TI'基因型和T等位基因頻率均高于2型糖尿病組(P<0．05)，且非糖尿病組TT型總膽固醇水平高于CC型(P<0．01)。無論是非糖尿病還是2型糖尿病組中有血脂紊亂者和無血脂紊亂者之間無差異。 結(jié)論：重慶地區(qū)人群中ACAT2734C／T多態(tài)性可能影響血脂代謝，但在2型糖尿病人群意義不明顯。 第三部分 雌激素、胰島素對(duì)高糖誘導(dǎo)的HepG2 細(xì)胞

6、?；o酶A：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶2表達(dá)的影響 目的：(1)研究高糖對(duì)HepG2細(xì)胞?；o酶A：膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)表達(dá)的調(diào)節(jié)作用及可能機(jī)制；(2)探討雌激素、胰島素對(duì)高糖誘導(dǎo)的ACAT2表達(dá)的影響。 方法：(1)構(gòu)建HN1真核表達(dá)質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞，采用RT-PCR和免疫印跡法檢測(cè)HNFl對(duì)ACAT2表達(dá)的影響；用5．5、12．5、25mmol／L三種濃度的葡萄糖溶液與HepG2細(xì)胞共同培養(yǎng)12h，采用

7、RT-PCR方法檢測(cè)ACAT2和HNFl的表達(dá)水平，EMSA檢測(cè)HNFl結(jié)合活性。(2)分別用雌激素、胰島素、雌激素+胰島素干預(yù)高糖條件下培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞共同孵育12h，采用RT-PCR和免疫印跡法檢測(cè)各組ACAT2的表達(dá)水平。 結(jié)果：(1)重組克隆測(cè)序結(jié)果與HNFlcDNA序列一致，HNFl轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞成功，高表達(dá)的HNFl可以增強(qiáng)ACAT2的表達(dá)；高糖可以誘導(dǎo)HNFl和ACAT2轉(zhuǎn)錄，并呈劑量依賴關(guān)系。在高糖組中H