二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶及脂肪酰胺水解酶在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、結(jié)直腸癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率居第四位，并且隨著我國飲食結(jié)構(gòu)和環(huán)境的改變，其發(fā)病率逐年上升。惡性增殖與侵襲能力是影響結(jié)直腸癌預(yù)后的最主要因素之一。所以研究增殖與侵襲的相關(guān)機(jī)制對(duì)于改善結(jié)直腸癌患者的預(yù)后具有重要的臨床意義。
　　 脂肪合成代謝的增加已證實(shí)是許多惡性腫瘤的共同現(xiàn)象，包括乳腺癌、前列腺癌和結(jié)直腸癌等[1]。脂滴作為脂代謝中重要的細(xì)胞器，其數(shù)量被發(fā)現(xiàn)在包括結(jié)直腸癌在內(nèi)的多種腫瘤細(xì)胞中明顯增多，并與腫瘤的侵襲能

2、力等多種生物學(xué)行為有關(guān)[2]。二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT1)是脂滴合成代謝中的關(guān)鍵酶，其在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及生物學(xué)行為尚未見報(bào)道。
　　 惡性腫瘤細(xì)胞中脂肪代謝的改變包括多種酶活性的調(diào)整，花生四烯酰乙醇胺(Anandamide，AEA)和花生四烯酰甘油(2-Arachidonoylglycerol，2-AG)是抑制惡性腫瘤增殖的兩種脂質(zhì)，其滅活主要通過脂肪酰胺水解酶(Fatty acid amide hydrolase，F(xiàn)A

3、AH)[3]。FAAH在結(jié)直腸癌中的表達(dá)尚未見報(bào)道。
　　 本課題擬通過研究脂肪代謝中兩種影響腫瘤細(xì)胞惡性增殖與侵襲的酶在結(jié)直腸癌中的表達(dá)，分析其與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系，為進(jìn)一步研究惡性腫瘤的治療提供方向。
　　 目的：檢測DGAT1和FAAH在結(jié)直腸癌及正常腸粘膜中的表達(dá)，探討其臨床意義，并研究抑制DGAT1酶活性對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移侵襲能力的影響。
　　 方法：采用結(jié)直腸癌及對(duì)應(yīng)正常腸粘膜病理組織標(biāo)本及結(jié)直腸癌

4、細(xì)胞株(HT-29、CaCo2、SW-480、SW-620、HCT-116和LoVo)為研究對(duì)象。
　　 分三部分進(jìn)行：
　　 第一部分探討結(jié)腸癌細(xì)胞株及組織中DGAT1蛋白表達(dá)及與各項(xiàng)臨床病理參數(shù)的關(guān)系：采用熒光定量PCR和免疫印跡法檢測了HT-29、CaCo2、SW-480、SW-620、HCT-116和LoVo中DGAT1 mRNA和蛋白的表達(dá)；免疫組織化學(xué)染色檢測結(jié)直腸癌患者103例、相應(yīng)正常腸粘膜38例中DGA

5、T蛋白表達(dá)，分析其與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系。
　　 第二部分對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞株HT-29、HCT-116、SW-480施加DGAT1抑制劑，transwell實(shí)驗(yàn)觀察其遷移侵襲能力的變化。
　　 第三部分探討結(jié)腸癌組織中FAAH蛋白表達(dá)及與各項(xiàng)臨床病理參數(shù)的關(guān)系：采用組織芯片技術(shù)結(jié)合免疫組織化學(xué)染色檢測結(jié)直腸癌患者169例、相應(yīng)正常腸粘膜38例中FAAH蛋白表達(dá)，分析其與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系。
　　 結(jié)果
　　

6、 1.DGAT1在高侵襲性結(jié)腸癌細(xì)胞株HT29中高表達(dá)，在低侵襲性細(xì)胞株CaCo2、SW-480中低表達(dá)；DGAT1在103例結(jié)直腸癌組織中的陽性表達(dá)率顯著高于正常腸粘膜(77.7% vs.44.7%，P<0.01)，并與腫瘤的分化程度密切相關(guān)(P<0.01)。
　　 2.經(jīng)DGAT1特異性抑制劑處理后，HT-29、HCT-116、SW-480細(xì)胞的遷移能力和HT29的侵襲能力不同程度受到抑制，其中高表達(dá)DGAT1細(xì)胞株HT-

7、29抑制最顯著。
　　 3.FAAH在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)低于正常腸粘膜，169例結(jié)直腸癌組織中FAAH的陽性表達(dá)率顯著低于正常腸粘膜(56.8% vs.97.4%，P<0.001)，并與腫瘤的分化程度密切相關(guān)(P<0.01)。
　　 結(jié)論
　　 1、DGAT1在結(jié)直腸癌及正常腸粘膜中表達(dá)存在差異性，且高侵襲性細(xì)胞株HT29中高表達(dá)，提示DGAT1在結(jié)直腸的發(fā)生發(fā)展及侵襲中可能發(fā)揮重要作用。
　　 2、D