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文檔簡介
1、第一部分 肌源性泡沫細胞形成過程中酰基CoA:膽固醇?;D移酶1的酶活性改變及調(diào)節(jié)機制目的 構建血管平滑肌源性泡沫細胞(FC)模型,探討FC形成過程中,?;鵆oA:膽固醇酰基轉移酶1(ACAT1)的酶活性改變及調(diào)節(jié)機制.方法 培養(yǎng)小鼠血管平滑肌細胞(VSMC),采用100μg/ml的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)作用于VSMC 72小時,建立FC模型.用半定量RT-PCR、Western-Blot和放射性同位素標記的方法,分別檢測VS
2、MC和FC中ACAT1的mRNA水平,蛋白水平及酶活性.第二部分 IL1β和TNFα對肌源性泡沫細胞中?;鵆oA:膽固醇?;D移酶1的調(diào)節(jié)機制目的 探討IL1β和TNFα對ACAT1 mRNA水平、蛋白水平及ACAT1酶活性的影響,進一步探討AS形成的機制及其調(diào)節(jié)水平.方法 培養(yǎng)小鼠VSMC,并將100μg/ml的ox-LDL作用于VSMC 72小時,建立FC模型.在VSMC及FC中分別加入IL1β和TNFα,使TNFα終濃度為20ng
3、/ml,IL1β終濃度為10ng/ml,孵育24小時,用半定量RT-PCR、Western-Blot和放射性同位素標記的方法,分別檢測ACAT1 mRNA水平、ACAT1蛋白表達及ACAT1酶活性.第三部分 格列本脲對肌源性泡沫細胞中?;鵆oA:膽固醇酰基轉移酶1的調(diào)節(jié)目的 探討降糖藥格列本脲對ACAT1酶活性的影響,進一步探討格列本脲對AS的影響.方法 培養(yǎng)小鼠VSMC,并將100μg/ml的ox-LDL作用于VSMC 72小時,建立
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