八角有效部位提取及其生物活性研究.pdf

1、本論文以廣西特色林產資源八角和提取揮發(fā)油后的八角渣為原料,系統(tǒng)進行了多糖、總黃酮、抗氧化劑和莽草酸等多個有效部位提取及其生物活性研究,大大提高了八角的綜合利用率。其中,揮發(fā)油提取率為7％,多糖提取率為11％,總黃酮提取率為24％,莽草酸提取率為13％。提取揮發(fā)油后剩余的八角渣中,多糖提取率為7％,總黃酮提取率為17％。具體的工作有:開展了以溶劑法提取八角多糖和總黃酮成分的研究,優(yōu)化提取工藝;分離、純化并分析八角多糖的結構;考察八角多糖的

2、體內抗腫瘤活性以及八角黃酮的降血壓活性;從八角和八角渣中提取抗氧化劑,并采用多種體系評價其抗氧化性能;探索和改進八角莽草酸的提取純化工藝。主要研究內容和取得的成果如下:
　　 (1)建立了用3,5-二硝基水楊酸吸光光度法測定八角及八角渣中的總糖和還原糖含量的分析方法,操作簡單方便,精密度、重現(xiàn)性良好。實驗結果表明:八角經過一次水中蒸餾提取揮發(fā)油后,剩余的殘渣中仍含有相當數(shù)量的、值得利用的總糖和還原糖(分別占原有含量的79.4％、

3、31.4％)。通過正交試驗法對八角多糖的提取工藝條件進行優(yōu)化,各個因素對提取效果影響的主次順序為提取溫度＞提取次數(shù)＞料液比＞提取時間,八角多糖的最佳提取條件為A3B2C1D2,即提取溫度100℃、時間4h、提取料液比為1:11、提取次數(shù)2次,最佳提取率可達10.50％。
　　 (2)利用DEAE-纖維素離子交換柱、凝膠SephadexG-100柱分離純化了八角粗多糖,制得單一組分的八角精制多糖,HPGPC分析得到其分子量為520

4、47。利用HPLC分析了八角多糖的單糖組成:由葡萄糖、樹膠醛糖、木糖組成,含量分別為50.54mg/g、11.01mg/g、2.301mg/g,摩爾比為18.3:4.8:1。同時利用HPLC分析了八角中的單糖組分:由葡萄糖和果糖組成,含量分別為0.5730mg/g、9.461mg/g。利用紅外光譜分析了八角多糖的結構。動物體內實驗顯示,八角粗多糖對S180肉瘤有一定的抑制作用,且粗多糖對免疫器官無抑制作用,毒副作用小。
　　 (

5、3)通過正交試驗法分別對八角和八角渣中的總黃酮提取工藝條件進行優(yōu)化,并進行了驗證試驗,結果顯示運用最佳提取工藝,八角中總黃酮提取率為23.61％,八角渣中總黃酮提取率為16.81％,說明八角和八角渣中含有相當豐富的、可利用的黃酮類化合物。在考查八角總黃酮提取影響因素的正交試驗中,四個因素對提取效果影響的主次順序為提取次數(shù)＞料液比＞提取時間＞乙醇體積分數(shù)。八角總黃酮最佳提取條件為乙醇體積分數(shù)為80％、料液比為1:30、提取時間120min

6、、提取次數(shù)3次。在考查八角殘渣總黃酮提取影響因素的正交試驗中,四個因素對提取效果影響的主次順序為乙醇體積分數(shù)＞提取次數(shù)＞提取時間＞料液比。八角殘渣總黃酮最佳提取條件為50％乙醇、料液比為1:10、提取時間120min、提取次數(shù)3次。選擇動物慢性降壓實驗用于觀察八角總黃酮的降壓作用。結果表明,八角總黃酮對高血壓大鼠無明顯的降壓作用。
　　 (4)從八角和八角渣中提取抗氧化劑,并采用多種體系評價其抗氧化性能。結果表明:八角提取物對羥

7、自由基、超氧陰離子和DPPH·均具有較強的清除作用,且在一定的濃度范圍內其自由基清除率隨濃度的增加呈上升趨勢。其中對DPPH·的清除能力最強,各提取物的清除能力均強于抗壞血酸兩倍以上。根據(jù)IC50值比較出各物質的清除能力大小,清除羥基自由基次序為:抗壞血酸＞八角渣水提液＞八角渣醇提液＞八角醇沉液＞八角水提液＞八角醇提液;清除超氧陰離子自由基次序為:抗壞血酸＞八角渣醇提液＞八角渣水提液＞八角醇提液＞八角水提液＞八角醇沉液;清除DPPH·次

8、序為:八角渣水提液＞八角渣醇提液＞八角水提液＞八角醇提液＞八角醇沉液＞抗壞血酸。實驗方法不同,清除的自由基不同,各種物質表現(xiàn)出來的清除能力的大小次序也不盡相同。在實驗所考察的三種清除自由基體系中,八角渣提取物的清除能力均強于八角提取物。
　　 (5)探索和改進八角莽草酸的提取純化工藝,確定了高效提取純化莽草酸的工藝路線:微波提取——醇沉純化——-柱層析法進一步純化莽草酸。并建立了HPLC測定莽草酸的方法。醇沉法用于八角莽草酸的純