芳樟葉中有效成分的提取及其生物活性研究.pdf

1、樟樹(Cinnamomumcamphora)是我國生產(chǎn)天然香料芳香油的主要樹種，用途廣，經(jīng)濟價值高。近年來，通過組培、扦插等技術(shù)培育出純種芳樟，大大提高樟樹資源的經(jīng)濟價值。但由于對芳樟廢棄物的資源化研究力度不夠，忽視了許多有藥用價值的化學成分如生物堿、多糖和內(nèi)酯類等化合物的開發(fā)利用，造成芳樟資源浪費嚴重，為使芳樟資源發(fā)揮出最好的社會效益和經(jīng)濟效益，有必要改進和發(fā)展芳樟有效成分的提取工藝以及尋找其中有生物活性的有效成分。 近年來，

2、超聲波輔助提取技術(shù)已被廣泛應用于農(nóng)業(yè)、食品和化工醫(yī)藥等領域。由于其提取速率快、溶劑用量少、提取率高，使之成為天然產(chǎn)物提取的有利工具。本論文首次將超聲波技術(shù)應用于芳樟葉有效成分的提取等研究工作，效果較好，具有較高的實際應用價值。 利用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)，在芳樟葉中共檢測出14種常量和微量無機元素。通過化學成分預試驗，發(fā)現(xiàn)芳樟葉中化學成分種類豐富，其中不乏有抗腫瘤研究的熱點物質(zhì)，如內(nèi)酯類、生物堿類以及多糖等。

3、 運用正交試驗法優(yōu)化超聲提取工藝，主要考察乙醇濃度、萃取時間和料液比對芳樟葉內(nèi)酯類物質(zhì)提取的影響。結(jié)果表明，超聲提取的最佳工藝條件是：用95％乙醇浸泡24h，超聲萃取15min，料液比1∶20。 采用系統(tǒng)溶劑法結(jié)合MTT抗癌試驗，對芳樟葉乙醇提取物進行分離和活性篩選。結(jié)果表明，石油醚部份EP對體外培養(yǎng)的人體肺癌95-D細胞、人口腔表皮樣癌KB細胞和肝癌HepG2細胞的抑制作用最強，其IC50值分別為128μg·mL-1(95-

4、D)，47.9μg·mL-1(KB)，97.1μg·mL-1(HepG2)。 以MTT抗癌試驗為指導，利用硅膠柱層析技術(shù)對石油醚部份EP進一步分離純化。實驗表明，分段洗脫組分EP-S1的IC50值247μg·mL-1(95-D)，111μg·mL-1(KB)均小于其余洗脫組分，而EP-S2的IC50值90.9μg·mL-1(HepG2)小于其余洗脫組分。而在9個梯度洗脫組分中，EP-G5的抗癌活性最高，其IC50值分別為68.5

5、μg·mL-1(95-D)，31.5μg·mL-1(KB)，57.9μg·mL-1(HepG2)，并小于石油醚部份EP的IC50值；EP-G4也體現(xiàn)出一定的體外抗癌活性，其IC50值與EP-G5接近；而其它洗脫組分的體外抗癌活性均低于石油醚部份EP。 用濾紙片法研究芳樟葉各提取物的抑菌活性，結(jié)果表明，石油醚部份EP的抗菌活性最高，其最低抑制濃度分別為0.5g·L-1(金黃色葡萄球菌)、0.6g·L-1(大腸桿菌)、0.1g·L-