海黍子多酚的提取分離及其生物活性研究.pdf

1、海黍子（Sargassum kjellmaniamum）為馬尾藻科，褐藻門，自然分布于大西洋沿岸和我國(guó)東南沿海以及渤海灣等海域。海黍子中含有多種活性物質(zhì)，包括多酚，其有抗氧化、抑菌、抗病毒、抗腫瘤等生物活性。本文研究了海黍子多酚的提取工藝，并進(jìn)行分離純化，初步探索了海黍子多酚的抗氧化和抑菌活性，為海黍子的開發(fā)與利用提供了理論依據(jù)。用乙醇浸提法提取海黍子多酚，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)海黍子多酚的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，并用NKA-9大孔樹脂

2、和Sephadex LH-20凝膠柱層析對(duì)海黍子多酚粗提物進(jìn)行了分離純化。通過(guò)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)，研究了海黍子多酚各組分清除DPPH自由基、羥基自由基、超氧離子陰離子的能力，并測(cè)定了其對(duì) Fe離子還原能力和氧自由基吸收能力ORAC值，以評(píng)定海黍子多酚的體外抗氧化活性；通過(guò)濾紙片法和動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)測(cè)定了海黍子多酚的抑菌活性。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴海黍子多酚的最佳提取工藝為：溫度70℃、乙醇濃度50％、提取時(shí)間8 h、料液比1:25。用

3、最佳工藝提取后的多酚得率為5.96 mgGA/g（干重），其多酚含量為2.17 mgGA/g。經(jīng)無(wú)水乙醚和氯仿萃取后萃取液中多酚含量明顯提高，萃取物中多酚含量為3.62 mgGA/g。經(jīng)NKA-9大孔樹脂吸附后，分成兩個(gè)組分F1、F2，其多酚含量分別為4.40 mgGA/g和5.52 mgGA/g。再經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱層析分離純化，組分F1僅出現(xiàn)一個(gè)峰F1-1，其多酚含量為4.57 mgGA/g；將組分F2分成了兩個(gè)組

4、分F2-1和F2-2，其多酚含量分別為5.28 mgGA/g和6.61 mgGA/g。⑵抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明海黍子多酚有清除DPPH自由基、羥基自由基、超氧離子陰離子的能力，有還原能力和氧化自由基吸收能力。隨著濃度的升高，各組分的抗氧化活性均增大。其中F1對(duì)DPPH和超氧陰離子自由基的清除能力及氧化自由基吸收能力最好，萃取物對(duì)羥基自由基的清除能力最好，F(xiàn)2-1對(duì)鐵離子還原能力最好。海黍子多酚各組分的抗氧化效果好于Vc。⑶海黍子多酚對(duì)枯草芽

5、孢桿菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌和金黃色葡萄球菌均有抑制作用，對(duì)變形桿菌抑制效果最好，對(duì)大腸桿菌和希瓦氏菌沒(méi)有抑制作用。對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的抑制效果比革蘭氏陰性菌好。其中對(duì)枯草芽孢桿菌抑制效果最好的是F1、F2，其最低抑菌濃度均為6.25μg/mL；對(duì)產(chǎn)氣桿菌抑制效果最好的是F1、F2、F2-1，其最低抑菌濃度均為3.125μg/mL；對(duì)變形桿菌抑制效果最好的是F2、F2-1、F2-2，其最低抑菌濃度均為3.125μg/mL；對(duì)金黃色葡萄球菌抑制