八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜的生物活性及兩種保護(hù)酶的影響.pdf

1、甘藍(lán)蚜(Brevicoryne brassicae L.)是十字花科蔬菜的主要害蟲之一，可以傳播多種病毒病，影響蔬菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，而長期的化學(xué)農(nóng)藥防治帶來了嚴(yán)重的“三R”問題。為了開發(fā)低毒、無殘留及對環(huán)境友好的植物源農(nóng)藥，本研究以“藥食同源”的八角茴香干果為材料，用不同極性的3種有機(jī)溶劑分別對其進(jìn)行提取，并對各提取物的成分進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)分析;利用八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜進(jìn)行生物活性測定和甘藍(lán)蚜的盆栽藥效試驗(yàn)，并研究了

2、不同提取物觸殺處理后對甘監(jiān)蚜體內(nèi)過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)活性的影響，為將八角茴香開發(fā)為植物源殺蟲劑提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究取得如下主要結(jié)果:
　　1、八角茴香干果的有機(jī)溶劑浸提以及提取物的成分分析
　　用甲醇、石油醚和乙酸乙酯3種有機(jī)溶劑對八角茴香干果在35℃下進(jìn)行熱提取，提取率分別為24.83％、14.00％和19.06％。采用GC-MS分析甲醇、石油醚、乙酸乙酯提取物中的化學(xué)成分，分別鑒定出45、44和

3、42種化合物，其中最主要的成分是反式茴香腦，其含量分別為62.05％、61.99％和47.52％。對八角茴香提取物中組成成分的分析，為將來進(jìn)一步研究其殺蟲活性成分以及分離、純化提供一定的依據(jù)。
　　2、八角茴香3種提取物對甘藍(lán)蚜的生物活性測定
　　2.1八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜的觸殺作用
　　設(shè)計(jì)了0.188、0.375、0.750、1.500和3.000 mg/mL5個濃度梯度，采用噴霧法和浸漬法分別測定了八角茴香3種

4、提取物對甘藍(lán)蚜的觸殺效果。結(jié)果表明3種提取物的2種不同的處理方法均對甘藍(lán)蚜有較強(qiáng)的觸殺效果。甲醇、石油醚、乙酸乙酯提取物使用噴霧法處理甘藍(lán)蚜60 h后，致死中濃度LC50分別為0.281、0.176和0.115 mg/mL，3.000 mg/mL濃度下對甘藍(lán)蚜的校正死亡率分別為77.36％、96.38％和89.41％;使用浸漬法處理的LC50分別為0.235、0.101和0.106 mg/mL，其校正死亡率分別為78.69％、99.55

5、％和90.74％，表明浸漬法對甘藍(lán)蚜的觸殺效果稍好于噴霧法，且3種提取物在2種處理方法中對甘藍(lán)蚜的觸殺效果均隨著濃度的升高而增強(qiáng)。
　　2.2八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜的忌避作用
　　用5個濃度測定了八角茴香各提取物對甘藍(lán)蚜的忌避效果。結(jié)果表明八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜的忌避作用隨著濃度的減小、時間的延長而降低。3.000 mg/mL的甲醇、石油醚、乙酸乙酯提取物處理甘藍(lán)蚜24 h時的忌避率分別為73.36％、87.72％和80.1

6、2％，忌避作用以石油醚提取物最強(qiáng);低濃度下(0.188 mg/mL)甲醇、乙酸乙酯提取物對甘藍(lán)蚜的忌避作用相當(dāng)。
　　2.3八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜的內(nèi)吸活性
　　測定了5個濃度的八角茴香3種提取物對甘藍(lán)蚜的內(nèi)吸活性。結(jié)果表明八角茴香各提取物對甘藍(lán)蚜有較好的內(nèi)吸殺蟲活性。在以3.000 mg/mL濃度的甲醇、石油醚、乙酸乙酯提取物處理甘藍(lán)蚜72 h后校正死亡率分別為56.67％、68.01％和79.19％，LC50分別為1.1

7、61、0.713和0.424 mg/mL，以乙酸乙酯提取物對甘藍(lán)蚜內(nèi)吸作用最強(qiáng)。
　　2.4八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜的種群抑制作用
　　采用噴霧法將5個濃度梯度的八角茴香3種提取物均勻噴灑到甘藍(lán)葉片上，以丙酮水溶液為對照，結(jié)果表明同種提取物隨著濃度的升高對甘藍(lán)蚜的種群抑制作用顯著增強(qiáng);在3.000mg/mL濃度下，甲醇、石油醚、乙酸乙酯提取物對甘藍(lán)蚜的種群抑制率分別為47.11％、56.31％和52.38％，以石油醚提取物對蚜

8、蟲的種群抑制作用最強(qiáng)，乙酸乙酯提取物次之，最弱的是甲醇提取物。
　　3、八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜的盆栽藥效實(shí)驗(yàn)
　　利用5個濃度的八角茴香3種提取物對盆栽甘藍(lán)上的蚜蟲進(jìn)行藥效試驗(yàn)，結(jié)果表明在用濃度為3.000 mg/mL處理甘藍(lán)5d時，甲醇、石油醚、乙酸乙酯提取物對甘藍(lán)蚜的校正防效分別達(dá)86.06％、89.57％和88.22％，相同條件下以石油醚提取物防治效果最好。
　　4、八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜體內(nèi)2種重要保護(hù)酶活性的

9、影響
　　4.1對甘藍(lán)蚜體內(nèi)CAT、POD活性的濃度效應(yīng)
　　以0.188、0.375、0.750、1.500和3.000 mg/mL5個濃度梯度的3種八角茴香提取物對甘藍(lán)蚜進(jìn)行觸殺處理，24 h后測定其體內(nèi)CAT、POD活性，結(jié)果表明3種提取物對甘藍(lán)蚜體內(nèi)的CAT、POD均有抑制作用，隨著濃度的升高抑制作用增強(qiáng);不同提取物中以石油醚提取物對甘藍(lán)蚜體內(nèi)的CAT、POD抑制作用最強(qiáng)，甲醇提取物最弱，與觸殺效果呈正相關(guān)，說明CA

10、T、POD活性的降低可能是導(dǎo)致蚜蟲死亡的原因之一。
　　4.2對甘藍(lán)蚜體內(nèi)CAT、POD活性的時間效應(yīng)
　　以八角茴香3種提取物的LC50（甲醇:0.924 mg/mL;石油醚:0.253 mg/mL;乙酸乙酯:0.515 mg/mL）處理甘藍(lán)蚜后，每隔12h測定體內(nèi)CAT、POD活性，結(jié)果表明，12h時試蟲體內(nèi)CAT、POD活性明顯高于對照，表現(xiàn)出被激活，隨后試蟲體內(nèi)CAT、POD活性隨著時間的延長均有不同的變化趨勢，且到