黃河鯉魚魚鱗膠原蛋白的提取、性質(zhì)及膠原肽活性研究.pdf

1、在黃河鯉魚的加工過程中，魚鱗作為廢棄物大多被丟棄或者加工成魚飼料，其中含有豐富的膠原蛋白未被很好的利用。膠原蛋白具有天然的低毒性、生物降解性、低免疫活性、保濕性和營養(yǎng)性而廣泛地應(yīng)用于食品工業(yè)、化妝品、生物醫(yī)學(xué)材料等領(lǐng)域。本文從鯉魚魚鱗中提取膠原蛋白，對其提取工藝進行了優(yōu)化，研究其性質(zhì)和膠原肽的活性，為鯉魚魚鱗膠原蛋白的開發(fā)和利用提供了理論依據(jù)。研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.膠原蛋白含量是通過羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線法來測定的。試驗測得標(biāo)準(zhǔn)

2、曲線為：y=0.0652x+0.0028，R2=0.9995，證明其含量與吸光度有著很好的線性關(guān)系。魚鱗脫鈣工藝優(yōu)化的最佳條件為：鹽酸濃度為1.0mol/L，液料比為8:1，脫除時間為150min，脫除率為92.4％。
　　2.魚鱗膠原蛋白的提取工藝優(yōu)化結(jié)果：酸提優(yōu)化最佳條件是乙酸溶液的濃度為0.54mol/L、提取時間為42h、提取液料比為10:1。在此參數(shù)條件下，黃河鯉魚魚鱗膠原蛋白的提取率的理論預(yù)測值為15.75%，實際測得

3、的提取率為16.89%。酶提的最佳工藝參數(shù)為胃蛋白酶溶液的濃度為13.50mg/mL、提取時間為12h、提取液料比為10:1；在此參數(shù)條件下，黃河鯉魚魚鱗膠原蛋白的提取率的理論預(yù)測值為15.06%，實際測得的提取率為16.75%。
　　3.膠原蛋白性質(zhì)：UV掃描結(jié)果顯示鯉魚魚鱗PSC和ASC在232nm波長處都有強烈吸收，符合Ⅰ型膠原的特征。紅外光譜掃描分析可以看出在3074.71 cm-1、2933.16 cm-1、2869.4

4、2 cm-1附近處的弱吸收是膠原蛋白特征吸收峰，可以證明提取物為膠原蛋白。SDS-PAGE凝膠電泳結(jié)果顯示 PSC和 ASC都有3條鏈，3條鏈為2條α鏈(α1和α2)和1條β鏈（2條α鏈的交聯(lián)體），這與相關(guān)文獻(xiàn)中報道的 I型膠原蛋白的特征一致。吸水性和保水性的試驗可以直觀的看出提取的膠原蛋白膠有很好的吸水性，市售明膠的吸水性較差；市售明膠與提取的魚鱗膠原的保水性的對比可知，魚鱗膠原在存放一段時間內(nèi)可以保持一定的水分，其效果要好于市售明膠

5、。
　　4.膠原肽活性研究結(jié)果表明：AS1398中性蛋白酶的水解能力最強，水解度達(dá)到71.84%，對應(yīng)的酶解產(chǎn)物對ACE活性的抑制率效果也是最好的，抑制率為51.43%，所以酶解過程選取AS1398中性蛋白酶為最佳的酶。通過對ACE膠原肽的提取工藝中幾個重要因素的試驗可以看出：提取溫度為45℃，pH為7.5，酶與底物的質(zhì)量體積比為1.5%，液料比為20:1時為最佳的提取條件，在此條件下的水解度為75.9%，ACE抑制率為55.8%