海蜇膠原蛋白的提取、純化及理化性質(zhì)研究.pdf

1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文海蜇膠原蛋白的提取、純化及理化性質(zhì)研究姓名：劉磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)指導(dǎo)教師：陳偉20090801A b s t r a c tA b s t r a c tT h e R h o p i l e m a e s c u l e n t u mK i s h i n o u y e , a k i n d o f w i d e l y d i s t r i b u t e di nn e r

2、i t i cC y p h o z o a ，b e l o n g s t oC o e l e n t e r a t ap h y l u m ，w h o s e m e s o g l o e a i sm a i n l y c o m p o s e do f c o l l a g e n ．C o l l a g e nw i t ha b u n d a n tc o n t e n t o f g l y c i

3、 n e ，p r o l i n e ，h y d r o x y p r o l i n ei st h em a i n p r o t e i no f E x t r a c e l I u l a rM a t r i x ( E C M ) ，w h i c h i s t h em a j o rf i b r o u se l e m e n to fs k i n ，b o n e ，t e n d o n ，c a

4、 r t i l a g e ，b l o o dv e s s e l s ，a n dt e e t h ，a n dh a sau n i q u e “G l y - X —Y ”s t r u c t u r ea n dt h r e e ．d i m e n s i o n a l s t r u c t u r e ．B e c a u s eo fi t s s p e c i a l b i o l o g i c

5、a l p r D p e r t i e s o fl o w - a n t i g e n i c i t y ，e a s y ．b i o d e g r a d a b i l i t y a n de x c e l l e n tb i o c o m p a t i t y ，c o l l a g e nh a sb e e nw i d e l yu s e di n m e d i c a lt r e a t

6、m e n t s ，h e a l t hc a r e ，f o o dp r o c e s s i n g ，c o s m e t i c s a n d o t h e ri n d u s t r i a l s ．I nt h i s p a p e r , t h ec o m p o n e n t so fR h o p i l e m ae s c u l e n t u mw e r e f i r s t l

7、 yr e s e a r c h e d ，a n de x t r a c t i o ny i e l do f c o l l a g e nw a sr e g a r d e da sa ni n d e x t or e s e a r c ho n p r e p a r a t i o no f c o l l a g e nf r o mR h o p i l e m a e s c u l e n t u m ．S

8、 e v e r a lf a c t o r sw e r ed e t e r m i n e dt h r o u g h s i n g l ef a c t o rt e s ta n dt h ec r a f tc o n d i t i o no f c o l l a g e nf r o mR h o p i l e m a e s c u l e n t u mW a so p t i m i z e d ．T h

9、 er e s u l ts h o w st h a tt h eb e s tc r a f tc o n d i t i o n W a s a c e t i ca st h eb e s ta c i d ，e n z y m a t i ca d d i t i o n1 ％，a c i d a d d i t i o n15 0 ％，a c i d o l y s i s it i m e 4 8h ．T h r o u

10、g hs a l t i n g 。o u ta n dC M 一5 2i o n —e x c h a n g ec h r o m a t o g r a p h y , t h ec r u d ec o l l a g e nw a sp u r i f l e d ．T h ec o l l a g e ns a m p l eo b t a i n e dW a se x a m i n e db yS D S ．P A G

11、 E a n df o u n di t c o n t a i n st w od i f f e r e n ta c h a i n s ，a la n d 毗a n d p c h a i n ，s h o w i n g t h et y p i c a l p a t t e r n so f a t y p eI c o l l a g e nw i t ht h eb a n d s o f 僅l ，毗a n dpc o

12、 m p o n e n t ．T h e m o l e c u l a rw e i g h t o f a l a n da 2w e r ea b o u t1 16K Da n d 9 7 K Dr e s p e c t i v e l y ．T h e c o l l a g e n f i b r i l s f r o m R h o p i l e m a e s c u l e n t u m e x h i b

13、i t e d am a x i m u m a b s o r b a n c e a t2 3 5n l n ，w h i c h w e r e s i m i l a r t ot y p i c a l t y p e I c o l l a g e n ．T h e p r o p e r t i e so f c o l l a g e nw e r er e s e a r c h e do nw i t hv i s

14、c o s i t y ，a n dt h e r m o ．d e n a t u r a t i o nt e m p e r a t u r e ( T d ) a s i n d e x e s ．I ts h o w e d t h a tv i s c o s i t yo f c o l l a g e ns o l u t i o nW a si n c r e a s e d w i t ht h er i s e o

15、 f i t s c o n c e n t r a t i o na n ds t o r a g et i m ea n dd e c l i n ew i t ht h er i s e o fi t sc o t e m p e r a t u r e ．T h e r e l a t i o n s h i pb e t w e e n p H a n d v i s c o s i t yi sc o m p l e x ，

16、T d o f c o l l a g e nW a s 2 8 ．3 ℃．T h ea m i n oa c i dc o m p o s i t i o n o f c o l l a g e n sf r o mR h o p i l e m a e s c u l e n t u ms h o w e dG l y c i n ew a s t h em o s ta b u n d a n ta m i n oa c i d

17、i nt h e s ea m i n oa c i d s ( a b o u t1 ／3 ) ．T h ec o n t e n t so f P r o a n dH y p w e r e 8 ．3 8 ％a n d 6 ．3 3 ％r e s p e c t i v e l y ．T h e e m u l s i f i c a t i o n c a p a b i l i t y a n d s t a b i l i

18、t y o f c o l l a g e n W a s 5 9 ．5 ％a n d 6 3 ．6 ％r e s p e c t i v e l y , w h e n t h e c o n c e n t r a t i o n o f c o l l a g e n s o l u t i o n W a s 0 ．4 ％．T h e i n c r e a s e o fe m u l s i f i c a t i o nc

19、 a p a b i l i t yo fc o l l a g e nW a s r e m a r k a b l e ，b u te m u l s i f i c a t i o ns t a b i l i t yo f c o l l a g e nW a s u n r e m a r k a b l e w h e n t h e c o n c e n t r a t i o no f c o l l a g e n

20、s o l u t i o n e x c e e d e d 0 ．2 ％．T h ee m u l s i f i e a t i o nc a p a b i l i t ya n de m u l s i f i c a t i o ns t a b i l i t ya c h i e v e dt h em a x 4 7 ．2 ％a n d5 9 ％a tp H 7 ．0 ．T h e h y g r o s c o p

21、i c i t yo f c o l l a g e nW a s12 ．5 8 ％i nR ．H4 3 ％，w h i c h W a s 17 ．6 4 ％i nR ．H8 1 ％．K e y w o r d s ：R h o p i l e m a e s c u l e n t u m K i s h i n o u y e ；C o l l a g e n e x t r a c t i o n ；p u r i f i c