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文檔簡介
1、我國是世界上養(yǎng)鵝大國,其年出欄量約占世界的80%,并且每年鵝養(yǎng)殖量總體呈現(xiàn)上漲的趨勢。浙東白鵝作為地方優(yōu)勢品種,在浙江地區(qū)養(yǎng)殖范圍較廣。鵝皮中含有豐富的膠原蛋白,膠原蛋白經(jīng)水解后可形成具有多種生物活性的膠原蛋白肽,而抗氧化性是膠原蛋白肽重要的功能活性之一。本文以新鮮鵝皮為原料,利用胃蛋白酶酶解法提取鵝皮膠原蛋白,通過可控酶解技術(shù)采用分步酶解法制備抗氧化性膠原蛋白肽,利用體外化學(xué)模型和細胞模型綜合評價膠原蛋白肽的抗氧化活性,最后將提取的膠
2、原蛋白制備膠原蛋白-殼聚糖可食性復(fù)合膜,用于肉品的保鮮。
首先,利用已有的提取工藝提取膠原蛋白,確定了采用木瓜+風味蛋白酶復(fù)合酶和堿性蛋白酶分步水解法制備鵝皮膠原蛋白肽生產(chǎn)工藝條件。本試驗采用單因素方差分析優(yōu)化二次酶解的水解用酶;在單因素試驗的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)曲面法確定最佳 pH、酶解溫度和酶解時間。結(jié)果表明,在膠原蛋白的二次酶解中,以堿性蛋白酶酶解產(chǎn)物抗氧化活性較好,堿性蛋白酶的最優(yōu)酶解條件為pH8.96、酶解溫度為49.2
3、7℃、酶解時間為5.68 h,此時所得多肽還原力達到13.56×10-2,較優(yōu)化前提高了3.51%。
其次,采用葡聚糖G-50凝膠過濾層析在220 nm處對酶解產(chǎn)物進行分離、純化,收集得到 A、B、和 C三個分離組分,濃縮干燥后對各個組分進行體外抗氧化性測定,試驗結(jié)果顯示膠原蛋白肽C組分對DPPH自由基、O2-自由基和OH自由基清除能力、Fe3+還原能力均高于A、B組分。
再次,以小腸上皮細胞(IEC-6細胞)為研究
4、對象,建立H2O2誘導(dǎo)IEC-6細胞氧化損傷模型,探究鵝皮膠原蛋白肽C組分對H2O2誘導(dǎo)的IEC-6細胞氧化損傷的保護機制。試驗結(jié)果表明:膠原蛋白肽濃度范圍在50-200 mg/L時,對IEC-6細胞無明顯細胞毒性作用;使用含有鵝皮膠原蛋白肽C組分的完全培養(yǎng)液培養(yǎng) IEC-6氧化損傷細胞時,與膠原蛋白肽濃度為0 mg/L試驗組相比,細胞活力增強(p<0.05),丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量顯著下降(p<0.05)
5、,乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)釋放率減少(p<0.05);IEC-6細胞內(nèi)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、過氧化氫酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)抗氧化酶活性增加,此研究顯示膠原蛋白肽能夠?qū)2O2誘導(dǎo)的IEC-6細胞氧化損傷起到保護作用。
最后,以膠原蛋白和殼聚糖為原料,制備
6、了膠原蛋白-殼聚糖可食性復(fù)合膜,用于鴨肉的保鮮。本試驗顯示殼聚糖含量少于40%時,隨殼聚糖含量的增加,復(fù)合膜水蒸氣透過系數(shù)明顯降低;當殼聚糖含量超過40%時,水蒸氣透過系數(shù)趨于穩(wěn)定;復(fù)合膜的拉伸強度隨殼聚糖含量增加,呈先增加后減少的趨勢,當膠原蛋白與殼聚糖比為4:6時復(fù)合膜的拉伸強度為36.05 MPa;復(fù)合膜的斷裂伸長率隨殼聚糖含量增多而增大;對新鮮鴨肉進行膠原蛋白-殼聚糖復(fù)合膜涂膜處理,降低了鴨肉貯藏過程中 TVB-N含量,提高了肉
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