腫瘤還原微環(huán)境響應(yīng)性磁性納米膠束的制備及其藥物傳輸研究.pdf

1、癌癥是目前世界上致命性最強(qiáng)的疾病之一。傳統(tǒng)的化療方法以一種非選擇性的方式將毒性抗癌劑傳遞至癌變組織同時(shí)，也顯著傳遞至正常的組織或器官，產(chǎn)生顯著毒性和嚴(yán)重的副作用。此外，許多抗癌藥物的疏水性大大地削弱了它們?cè)诨熤械睦枚?。而膠束型納米傳遞系統(tǒng)具有多方面的優(yōu)勢(shì)，包括核-殼結(jié)構(gòu)的物化特性、親水性的殼產(chǎn)生水溶液中的高穩(wěn)定性、疏水性的核對(duì)不溶性藥物的增溶作用，以及增加包裹藥物傳遞到細(xì)胞中的劑量，因此提高藥物利用度。再者，它們不易于被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)

2、吸收，提高血液中循環(huán)時(shí)間，并且可以通過(guò)增強(qiáng)透過(guò)性和保留(EPR)效應(yīng)被動(dòng)靶向至實(shí)體瘤部位，大大增加靶向性。
　　除了裝載疏水性藥物，聚合物納米粒子還可以用來(lái)組裝無(wú)機(jī)納米粒子以用于光學(xué)成像、磁共振成像(MRI)和靶向藥物傳遞。超順磁性四氧化三鐵納米粒子已經(jīng)被裝載進(jìn)聚合物膠束中作為造影劑用于超靈敏的磁共振成像。然而，裝載四氧化三鐵納米粒子的膠束刺激響應(yīng)性、細(xì)胞內(nèi)在化作用，尤其是各種刺激條件下納米粒子與細(xì)胞的相互作用，穿膜能力等還沒(méi)有被

3、系統(tǒng)研究過(guò)。這些是構(gòu)建高效納米藥物傳遞體系及許多其他生物醫(yī)藥應(yīng)用中的極其重要的因素。
　　在本文中，我們構(gòu)建了一種基于還原響應(yīng)性的兩親性共聚物:聚乙二醇聚酰胺胺(MPEG-rPAA)或者聚乙二醇聚酯胺(MPEG-rPAE)，和Fe3O4磁性納米粒子的磁性膠束納米載體，并且對(duì)它的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了系統(tǒng)研究，討論了其利用EPR效應(yīng)和磁導(dǎo)向性用于雙重靶向疏水藥物傳遞的潛在應(yīng)用。磁性納米載體是通過(guò)將成簇的Fe3O4磁性納米粒子裝載進(jìn)由共聚

4、物MPEG-rPAE自組裝形成的膠束核中而制得的。本文還對(duì)它的物理化學(xué)性質(zhì)，如形態(tài)、表面電荷、粒徑、穩(wěn)定性和磁性行為進(jìn)行了研究和測(cè)定。磁性納米載體的細(xì)胞毒性通過(guò)體外MTT實(shí)驗(yàn)評(píng)估得到，使用了兩種細(xì)胞系—人宮頸癌細(xì)胞系(HeLa)、人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)。動(dòng)態(tài)光散射(dynamic laser scattering，DLS)被用于還原敏感性表征。共聚焦激光掃描顯微鏡(Confocal Laser Scanning Microscop

5、y)用于研究細(xì)胞內(nèi)藥物輸送過(guò)程、內(nèi)吞過(guò)程、納米顆粒與亞細(xì)胞器的相互作用。我們還進(jìn)行了流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)通過(guò)使用藥理抑制劑:氯丙嗪、染料木黃酮、阿米洛利、諾考達(dá)唑、4℃，干擾人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)來(lái)探討該細(xì)胞對(duì)納米材料的內(nèi)吞過(guò)程及機(jī)制。結(jié)果表明，網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)內(nèi)吞(clathrin-mediated endocytosis)作用和膜泡運(yùn)輸(vesiculartransport)是納米顆粒被MCF-7細(xì)胞內(nèi)化的主要途徑。總之，我們的結(jié)果表明作