水產(chǎn)品中三聚氰胺的HPLc-MS法檢測及殘留規(guī)律研究.pdf

1、本研究以我國主要養(yǎng)殖水產(chǎn)品金鯧魚(Trachinotus blocht)、羅非魚(Tilapia)、凡納濱對蝦(Penaeus vannamei)及其飼料為原料。通過對前處理方法、色譜條件和質(zhì)譜條件的優(yōu)化等方面的研究，建立了水產(chǎn)品及其飼料中三聚氰胺的HPLC-MS檢測方法并研究了三聚氰胺在凡納濱對蝦體內(nèi)的殘留消除規(guī)律。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1、水產(chǎn)品中三聚氰胺的DSPE-HPLC-MS檢測方法研究
　　建立水產(chǎn)品中三

2、聚氰胺的分散固相萃取-高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法(DSPE-HPLC-MS)。樣品用甲醇、pH4.5的乙酸銨緩沖溶液提取，分散固相萃取凈化。經(jīng)Thermo Fisher Hypersil Gold C18柱(150 mm×2.1 mm，5μm)分離，選擇反應(yīng)監(jiān)測(SRM)負(fù)離子模式測定。結(jié)果表明：三聚氰胺含量在5.0～50.0 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R2=0.9999，方法檢出限(S/N=3)為0.01 mg/kg，方法加標(biāo)回

3、收率為82.8％～100.4％，RSD均小于5.0％，適合檢測水產(chǎn)品中的三聚氰胺含量。
　　2、水產(chǎn)飼料中三聚氰胺的HPLC-MS檢測方法研究
　　通過對提取液的選擇、凈化方式的優(yōu)化和色譜柱的選擇，建立了水產(chǎn)飼料中三聚氰胺的HPLC-MS法。樣品經(jīng)乙腈水溶液(V：V，70:30)超聲提取，離心后取上清液與等體積乙腈混勻二次沉淀蛋白，冷凍離心后直接過濾膜即可上機(jī)測定。經(jīng)WatersAtlantis HILIC Silica(1

4、50 mm×2.1 mm，5μm)分離，選擇反應(yīng)監(jiān)測(SRM)負(fù)離子模式掃描。結(jié)果表明：在三聚氰胺含量為5.0～50.0 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R2=0.9996，方法最低檢出限(S/N=3)為0.01 mg/kg，加標(biāo)回收率為91.7％～98.5％，RSD均小于5.0％。樣品前處理方法簡便，凈化效果好，準(zhǔn)確度和精密度高，可用于水產(chǎn)飼料中三聚氰胺含量的測定。
　　3、凡納濱對蝦中三聚氰酸的HPLC-MS檢測方法研究

5、　　凡納濱對蝦樣品經(jīng)0.1％甲酸甲醇溶液提取用二甘醇破乳離心后取上清液過濾膜后直接上機(jī)測定。結(jié)果表明：三聚氰酸在5.0～50.0 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為R2=0.9998，最低檢出限(S/N=3)為0.01 mg/kg，加標(biāo)回收率為82.3％～101.4％，RSD均小于10.0％，適合于凡納濱對蝦體內(nèi)的三聚氰酸含量檢測。
　　4、三聚氰胺在凡納濱對蝦體內(nèi)的殘留和消除規(guī)律研究
　　模擬凡納濱對蝦養(yǎng)殖過程，在室

6、溫(23℃～29℃)條件下，凡納濱對蝦用普通飼料馴化7 d后再用不同劑量的含有三聚氰胺的飼料連續(xù)投喂25 d，研究三聚氰胺在凡納濱對蝦血液、肌肉和肝胰腺組織中的殘留消除規(guī)律。結(jié)果表明：飼料中添加三聚氰胺對凡納濱對蝦的體重有顯著影響(P<0.05)，對飼料系數(shù)沒有顯著影響(P>0.05)。投喂含有三聚氰胺的飼料，三聚氰胺在對蝦血液、肌肉和肝胰腺組織中均有殘留，當(dāng)飼料三聚氰胺含量為800 mg/kg時，對蝦中三聚氰胺殘留量最高部位是肝胰腺，