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1、S-腺苷蛋氨酸,又稱S-腺苷甲硫氨酸,英文名為S-Adenosyl-methionine(SAM),是生物體內(nèi)重要的活性物質(zhì),參與了生物體內(nèi)多種生化反應(yīng),對(duì)于關(guān)節(jié)炎、抑郁癥、肝功能紊亂等均有較好的療效,也是預(yù)防癌癥、心血管疾病和抗衰老的保健藥品,具有良好的臨床應(yīng)用前景,國(guó)內(nèi)外對(duì)其需求量不斷提高。
目前,SAM主要通過(guò)生物發(fā)酵法生產(chǎn)。但是,多年以來(lái),從生物發(fā)酵液中分離純化SAM一直是一個(gè)沒(méi)有得到很好解決的技術(shù)難題。由于SAM和殘
2、留的原料L-蛋氨酸(Met)具有相近的理化性質(zhì),而且生物發(fā)酵液中SAM產(chǎn)物的濃度非常低,采用傳統(tǒng)的方法難以分離純化SAM。同時(shí),由于SAM分子中存在高能琉璃子,容易受到親核攻擊,發(fā)生降解及硫原子上的手性異構(gòu)反應(yīng),導(dǎo)致SAM在分離純化過(guò)程中穩(wěn)定性差,易失活。本實(shí)驗(yàn)擬采用同步解析支撐液膜(SLM-SD)技術(shù)提取濃縮S-腺苷蛋氨酸,開(kāi)展了以下研究工作:
1.研究了采用SLM-SD技術(shù)濃縮1mmo/L的SAM,對(duì)料液相pH、有機(jī)相溶劑
3、成分、提取劑濃度、有機(jī)相體積、解析相酸組成、解析相pH、解析相NaCl濃度等條件進(jìn)行了優(yōu)化,得出以下優(yōu)化濃縮條件,料液相:體積為500ml,pH為3.0的1mmol/LSAM磷酸溶液;有機(jī)相:體積為400ml、AOT濃度為2.24wt%的正辛醇溶液;解析相:體積為200ml,pH為2.2,NaCl濃度為1mol/L的磷酸鈉/硫酸溶液。1mmol/LSAM回收率在1小時(shí)達(dá)到最高值99.8%,提取率為99.9%。
2.研究了采用S
4、AM-SD技術(shù)濃縮10mmol/L的SAM,對(duì)提取劑濃度、解析相pH、解析相緩沖體系、解析相NaCl濃度進(jìn)行了篩選,得到以下優(yōu)化濃縮條件,料液相:體積為500ml,pH為3.0的10mmol/LSAM磷酸溶液;有機(jī)相:體積為400ml、AOT濃度為2.80wt%的正辛醇溶液;解析相:體積為200ml,pH為3.0,NaCl濃度為0.5mol/L的磷酸鈉/硫酸溶液。10mMSAM回收率在3小時(shí)達(dá)到最高值91.8%,提取率大于99%。
5、> 3.研究了采用兩步SLM-SD技術(shù)從10mmol/LSAM和2mmol/LMet發(fā)酵模擬液中提取SAM,對(duì)實(shí)驗(yàn)參數(shù):一級(jí)解析相pH、二級(jí)解析相pH、提取劑AOT、DEHPA、TOPO濃度、解析相NaCl濃度;工藝參數(shù):膜內(nèi)外壓差、分散相攪拌速率、料液相、解析相流速進(jìn)行了優(yōu)化,得到優(yōu)化提取條件為料液相:體積為500ml,pH為3.0的10mmol/LSAM、2mmol/LMet磷酸溶液;有機(jī)相:體積為400ml、AOT、DEHPA、
6、TOPO濃度為2.78wt%、27.00wt%、1.61wt%的正辛醇溶液;一級(jí)解析相:體積為200ml,pH為2.5,NaCl濃度為0.5mol/L的磷酸鈉/硫酸溶液;二級(jí)解析相:體積為300ml,pH為1.0,NaCl濃度為0.5mol/L的磷酸鈉/硫酸溶液。最終SAM提取率為98.7%,回收率為91.8%,分離因子為2.01,Met除去率為85.4%。
4.對(duì)兩步SLM-SD技術(shù)提取SAM進(jìn)行了傳質(zhì)動(dòng)力學(xué)分析,在優(yōu)化條件
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