S-腺苷蛋氨酸大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)及其肝腸首過代謝定量評(píng)價(jià).pdf

1、目的：腸道代謝能力在研發(fā)及制備口服生物制劑及新藥篩選中的作用日益受到人們的重視和關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)擬建立SAMe的大鼠血漿樣品HPLC-UV測(cè)定方法,并且通過IVAP模型研究SAMe腸道代謝過程,通過十二指腸、門靜脈及外周靜脈三種不同途徑分別給予不同劑量SAMe,定量評(píng)價(jià)SAMe肝臟和腸道首過代謝程度,并以CYP3A4及P-gp特異性抑制劑酮康唑及維拉帕米為工具藥,初步探討腸道CYP3A4及P-gp在SAMe腸道首過代謝中部分機(jī)制,為提高SA

2、Me口服生物利用度提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：建立IVAP大鼠模型,經(jīng)外周靜脈(70mg·kg-1,140mg·kg-1,280mg·kg-1)、門靜脈(70mg·kg-1,140mg·kg-1,280mg·kg-1)或十二指腸(140mg·kg-1,280mg·kg-1,560mg·kg-1)三種途徑給予高、中、低濃度的SAMe,分別于給藥前及給藥后0,1,10,20,30,40,60,90,120,180min經(jīng)大鼠頸動(dòng)脈取血0

3、.3mL,置肝素化試管中,10000r/min離心3min,分離血漿,-20℃保存待測(cè),血漿樣品經(jīng)處理后,HPLC-UV法測(cè)定血漿樣品中SAMe的濃度,采用DAS2.0藥動(dòng)學(xué)軟件分析處理數(shù)據(jù),確定藥動(dòng)學(xué)參數(shù),定量分析大鼠肝腸首過效應(yīng);并采取平行對(duì)照試驗(yàn),經(jīng)十二指腸給予CYP3A4特異性抑制劑酮康唑(60mg·kg-1)以及P-gp特異性抑制劑維拉帕米(9mg·kg-1),比較酮康唑及維拉帕米對(duì)十二指腸(280mg·kg-1)及外周靜脈(

4、140mg·kg-1)兩種給藥途徑下SAMe藥代動(dòng)力學(xué)影響。
　　結(jié)果：HPLC-UV法檢測(cè)大鼠血藥濃度,該方法專屬性好,靈敏度高,可靠性強(qiáng),SAMe能完全分離,線性范圍:10～2000μg·mL-1,回歸方程為Y=30241X+256204,r=0.9991,日內(nèi)精密度RSD分別為2.6％,3.6%,3.9%;日間精密度RSD分別為6.3%,4.9%,7.9%;回收率分別為107%,101%,98.3%。
　　IVAP模型

5、中,SAMe經(jīng)不同途徑給藥后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)AUC隨劑量呈比例關(guān)系增加,十二指腸給予三種不同劑量(140mg·kg-1,280mg·kg-1,560mg·kg-1)的SAMe,均在10min內(nèi)達(dá)峰濃度,AUCid值分別為68.60±19.54mg·L-1·h,151.99±35.91mg·L-1·h,449.19±27.53mg·L-1·h,各劑量間的AUCid及Cmax均隨劑量的增加而增加,而其各劑量間Tmax,T1/2及CL值均無顯著性

6、差異;門靜脈給予(70mg·kg-1,140mg·kg-1,280mg·kg-1)SAMe后,AUCipv值分別為161.10±29.51mg·L-1·h,457.86±106.83mg·L-1·h,766.82±151.73mg·L-1·h,其AUC隨劑量的增加而的增加,而其各劑量間T1/2及CL值均無顯著性差異;外周靜脈給藥劑量同門靜脈,其AUCiv值分別為197.09±74.03mg·L-1·h,577.25±161.61mg·L

7、-1·h,939.10±164.43mg·L-1·h,其AUC隨劑量的增加而增加,而T1/2及CL值均無顯著性差異。外周靜脈及門靜脈給藥后,其AUCiv及AUCipv均隨劑量的增加而增加,但與同劑量的十二指腸給藥后AUCid比較,AUCid明顯低于AUCiv及AUCipv。經(jīng)十二指腸預(yù)先給予酮康唑及維拉帕米預(yù)處理后,顯著增加id途徑下SAMe的AUC和Cmax值,但對(duì)SAMe靜脈藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無顯著性影響。經(jīng)十二指腸給予(140、280mg

8、·kg-1)后,其絕對(duì)生物利用度分別為10.16±2.07%,17.77±5.41%;肝臟攝取率(EH)分別為18.73±2.42%,12.25±2.85%;腸道攝取率(EI)分別為84.82±3.74%,79.86±5.53%。
　　結(jié)論：1.本實(shí)驗(yàn)方法在該線性范圍內(nèi)專屬性好,靈敏度高,可靠性強(qiáng),可用于SAMe藥動(dòng)學(xué)分析。
　　2.腸道、門脈及外周靜脈給予不同劑量SAMe,均經(jīng)歷了肝臟和腸道的代謝作用,經(jīng)門脈及外周靜脈給藥