弓形蟲ROP18-MIC2雙基因疫苗對小鼠的免疫保護性研究.pdf

1、弓形蟲是一種專性細胞內(nèi)寄生機會致病原蟲，分布廣泛，可感染包括人類在內(nèi)的大部分哺乳動物。人類對弓形蟲普遍易感，孕婦感染后可通過胎盤垂直傳染給胎兒，導(dǎo)致畸胎、死胎。弓形蟲病也是最常見的機會性寄生蟲病，該病成為免疫功能嚴重低下患者（如HIV/AIDS、惡性腫瘤患者）的主要死亡原因。迄今尚無治療弓形蟲病的特效藥物，弓形蟲疫苗和免疫保護性研究已逐漸引起了重視，并認為疫苗接種可能是預(yù)防弓形蟲病的最佳策略。
　　 大量的動物和人體實驗表明，D

2、NA疫苗不僅可以預(yù)防，還可以治療病原生物的感染。在弓形蟲感染和包囊形成的防治過程中，疫苗是一種潛在高效經(jīng)濟的方法。由于弓形蟲生活史較復(fù)雜，抗原成分具有發(fā)育階段的特異性或差異性，因此在研究有關(guān)弓形蟲疫苗的過程中，發(fā)展多種抗原組合、針對不同生活史發(fā)育階段的復(fù)合多價疫苗是研究弓形蟲疫苗過程中的一個發(fā)展方向與共識，這有助于克服單一抗原成分作為候選疫苗的不足。
　　 棒狀體蛋白在蟲體入侵和納蟲空泡的形成和修飾過程中起著重要作用，是重要的入

3、侵和毒力作用因子。棒狀體蛋白18(rhoptryprotein18，ROP18)可以改變受感染的宿主細胞的信號傳導(dǎo)，阻止宿主細胞凋亡，改變感染細胞的基因表達，介導(dǎo)受感染細胞出現(xiàn)病理損傷。在最新研究中，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)當弓形蟲進入宿主細胞時，會生成一層保護膜包裹自身，使自己雖受細胞環(huán)境影響而不被殺死，ROP18的作用則是讓宿主細胞某些蛋白失效而無法破壞這層保護膜。
　　 微線體蛋白2(micronemeprotein2，MIC2)屬于

4、血小管反應(yīng)蛋白相關(guān)匿名蛋白家族，是蟲體入侵宿主細胞過程中一個必需的入侵因子，并在弓形蟲連接到宿主細胞的過程中發(fā)揮重要作用。然而，至今還未有研究對ROP18、MIC2作為抗弓形蟲病疫苗的潛力進行評估和檢測。
　　 本文利用一新型真核表達載體pBudCE4.1，此含有人巨細胞病毒(CMV)高效啟動子、增強子序列，是一種外源基因在哺乳動物內(nèi)高效表達的良好載體。該載體的特點是含有兩側(cè)分別有一些可插入的酶切位點，而且兩側(cè)分別都有各自的啟動