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1、中藥及復(fù)方成分復(fù)雜,種類繁多,除了研究較多的常量組分,還有大量尚未發(fā)現(xiàn)的微量和痕量組分。芙樸感冒顆粒是由木芙蓉葉、厚樸、陳皮、牛蒡子這四味中藥經(jīng)過適宜加工提取制成,臨床上廣泛用于治療風(fēng)熱及風(fēng)熱挾濕感冒。但是,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)該制劑所含化學(xué)成分的研究較少,導(dǎo)致其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究較薄弱。為初步探索芙樸感冒顆粒的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),本課題利用HPLC-IT-MSn液質(zhì)聯(lián)用儀,以芙樸感冒顆粒為研究對(duì)象,優(yōu)化并建立芙樸感冒顆粒復(fù)方及三種溶劑提取的單味藥材化
2、學(xué)成分快速鑒定方法,對(duì)該制劑所含化學(xué)成分和主要成分的抗炎活性進(jìn)行了研究。本文主要分為如下三個(gè)部分:
1.芙樸感冒顆粒整體成分的定性研究。以芙樸感冒顆粒作為主要研究對(duì)象,采用HPLC-IT-MSn方法對(duì)其進(jìn)行快速分離鑒定,結(jié)果共從芙樸感冒顆粒中檢測(cè)到117個(gè)化合物,通過比較液相保留時(shí)間,結(jié)合質(zhì)譜裂解數(shù)據(jù)、相關(guān)質(zhì)譜裂解規(guī)律和文獻(xiàn)數(shù)據(jù),快速推測(cè)和鑒定了72個(gè)化合物,包括25個(gè)木脂素類化合物,23個(gè)黃酮類化合物,15個(gè)酚酸類化合物,4
3、個(gè)生物堿類化合物和5個(gè)其它類化合物,并對(duì)每個(gè)化學(xué)成分進(jìn)行了藥材來源歸屬,較全面系統(tǒng)地分析了芙樸感冒顆粒中的化學(xué)成分,并對(duì)酚酸類、黃酮類、木脂素類和生物堿類化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律進(jìn)行了研究和總結(jié),為該制劑后續(xù)各項(xiàng)研究的開展提供化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。
2.單味中藥不同提取方法成分比較。分別采用水煎煮、95%乙醇提取、乙酸乙酯提取三種方法分別對(duì)四種中藥材進(jìn)行提取,使用優(yōu)化后的HPLC-IT-MSn方法進(jìn)行分離鑒定。結(jié)果從木芙蓉葉中鑒定出30個(gè)
4、化合物,其中8個(gè)為首次從該植物中測(cè)得;從厚樸中鑒定出38個(gè)化合物,其中7個(gè)為首次從該植物中測(cè)得;從陳皮中鑒定出75個(gè)化合物,其中11個(gè)為首次從該植物中測(cè)得;從牛蒡子中鑒定出55個(gè)化合物,其中9個(gè)為首次從該植物中測(cè)得。
3.芙樸感冒顆粒主要單體及復(fù)方的抗炎活性研究。以LPS誘導(dǎo)的RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞為炎癥模型,采用MTT法確定藥物濃度對(duì)細(xì)胞活性的影響,從而確定給藥濃度范圍。細(xì)胞培養(yǎng)液中分別添加不同濃度各樣品,然后再添加L
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