植物MARs的ARS功能鑒定以及對gus基因表達(dá)活性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、我們分別對該試驗(yàn)室分離得到的六個(gè)植物MARs(TM1,TM2,TM3,AM1,AM2,AM4)進(jìn)行ARS(Autonomous Replicating Sequence)功能鑒定,發(fā)現(xiàn)TM1和AM4具有強(qiáng)的自主復(fù)制功能,而其他四個(gè)植物MARs序列無ARS活性.為了進(jìn)一步對酵母自主復(fù)制功能進(jìn)行深入研究,利用PCR方法對TM1和AM4進(jìn)行亞克隆,相應(yīng)亞克隆分別命名為TM1-1、TM1-2、TM1-3、AM4-1、AM4-2和AM4-3.實(shí)驗(yàn)

2、發(fā)現(xiàn),TM1-3和AM4-3不僅具有比完整MARs更高的活性,而且在酵母轉(zhuǎn)化效率、轉(zhuǎn)化穩(wěn)定性及生長速度方面也優(yōu)于完整片段.為進(jìn)一步證明具有ARS功能的MAR增強(qiáng)外源基因表達(dá)作用,我們將具有ARS功能的TM1和AM4以及具有ARS功能的亞克隆片段TM1-3和AM4-3分別插入植物表達(dá)載體pBI121中g(shù)us基因表達(dá)盒的兩側(cè),通過轉(zhuǎn)基因植株來檢測這四個(gè)片段對gus基因表達(dá)的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,TM1、TM1-3、AM4、AM4-3分別使外源

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