產(chǎn)堿桿菌czcd基因的克隆，表達以及功能的初步研究

1、蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文產(chǎn)堿桿菌CzcD基因的克隆，表達以及功能的初步研究姓名：毛娟申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物學(xué) 植物學(xué)指導(dǎo)教師：謝小冬20080501蘭燃太學(xué)硬圭畢遂論文 產(chǎn)藏耔藤醞D 差斑酶克陵，表達瑤及蘑麓戇初步輯究A b s t r a c t刖糙C z c Dg e n ew a s l o c a t e di n t h ep l a s m i dp M O L 3 0 o f A l c a l i g e n e se

2、 u t r o p h u sC 秘3 4 。T h e r e s e a r c hh a v e r e v e a l e dt h a tt h ep r o t e i nC z e D i So n e o f t h eC Z C i r o ne f f i u xs y s t e m i nt h eA l c a l i g e n e se u t r o p h u s C H 3 4a n di t i

3、s a l l i m p o r t a n ti n d u c e r t o t h ee x p r e s s i o n o f C z c A ，B ，C ．T h e C Z C s y s t e m c a n p u m p a n d t r a n s p o r ts o m e h e a v y m e t a li r o nb Y p r o t e i n C z c A , B 。C 。I n

4、t h i sp a p e r , C z c Dg e n e w a s c l o n e d a n d t h ep r o d u c tw a st r a n s f o r m e di n t oE s c h e r i c h i ac o l iB L 2 1 t Os t u d yt h ee x p r e s s i o no f C z c D i nt h eh o s t ．W h e t h

5、e r o rn o t t h e C z e D h a d t h e h e a v y m e t a lr e s i s t a n c eW a s a l s ob e e ns t u d i e d i nt h i sp a p e r 。D i f f e r e n tp o s i t i v ea n d n e g a t i v e c o n t r o l sw e r e g a i n e d

6、 。A l lt h es t r a i n sg r e w i nt h em e d i u m w i t hd i f f e r e n th e a v y m e t a l t o s e et h eg r o w t hd i f f e r e n c eb e t w e e n t h e m ．T l l i sr e s e a r c hs u p p l i e ss o m er a t i o

7、n a l et ot h es t u d yo f t h e b a c t e r i u mh e a v y m e t a lr e s i s t a n c ea n dt h ec o n s t r u c t i o no f t h e n e w e n g i n e e r i n gs t r a i n s w h i c h h a v e t h e a b i l i t y t oc l e

8、a n t h eh e a v y m e t a lp o l l u t i o ni nt h ee n v i r o n m e m ．硼1 er e s u l t sw e r e a sf o l l o w s ：1 ．C z c Dg e n e W a s c l o n e d a n dt r a n s f o r m e d i n t oE s c h e r i e h i a c o i lB L

9、2 1 t og a i n t h es t r a i nP E T C Z C D ．A n d a b u n d a n c e o f p r o t e i nC z c D w a s g o t t e na f t e rP E T e Z C D W a sc u l t i v a t e di nt h eL B f o r4 h o u r s a t3 7 ℃w h e n t h eO D 6 0 0 W

10、 a sa t1 ．0 ，a d d i n g1 ．0 r a M球誓( 爻2 ．D i f f e r e n t p o s i t i v ea n dn e g a t i v e c o n t r o l sw e r eg a i n e d ．T h e △C H 3 4 w h i c h w a so b t a i n e d b y p l a s m i d c u r i n go f w i l d t

11、y p e A l c a l i g e n e s e u t r o p h u sC H 3 4 。T h e n t h ep l a m i do f P E _ r C Z C D W a s t r a n s f o r m e di n t o △C H 3 4 a n d t h es t r a i nw a s n a m e d J H 。3 ．T h ep r o t e i nC z c D c o u

12、l d g e n e r a t e r e s i s t a n c e t oh e a v y m e t a li t s e l f ．K e y w o r d s A l c a l i g e n e s e u t r o p h u sC H 3 4 ，C z c D g e n t , h e a v y m e t a lr e s i s t a n c e , p l a m i dc u r i n g