運(yùn)動(dòng)對(duì)PINK1 RNAi帕金森果蠅線粒體及其相關(guān)功能的影響.pdf

1、目的：本文使用PINK1 RNAi帕金森果蠅作為研究對(duì)象，對(duì)果蠅進(jìn)行3周運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，觀察測(cè)量果蠅的爬行能力、壽命以及線粒體功能的變化，觀察果蠅線粒體聚集情況、測(cè)定線粒體復(fù)合物I的活性，旨在證明運(yùn)動(dòng)能夠?qū)ε两鹕膊‘a(chǎn)生積極的影響或作用，并尋找運(yùn)動(dòng)的作用機(jī)制，為今后對(duì)帕金森疾病的治療或者預(yù)防提供理論依據(jù)。
　　方法：將用GFP標(biāo)記線粒體的果蠅進(jìn)行分組，包括不患病的UAS-mtGFP/cyo;Mhc/Mhc果蠅，和患病的UAS-mtGFP

2、/Cyo；Mhc-RNAi/TM2的果蠅兩種基因型，對(duì)患病果蠅進(jìn)行運(yùn)動(dòng)干預(yù)，運(yùn)動(dòng)持續(xù)3周，每周5天，每天運(yùn)動(dòng)時(shí)長(zhǎng)不同，按時(shí)長(zhǎng)分為4組，分為0分鐘組、30分鐘組、60分鐘組、90分鐘組，不患病的果蠅作為對(duì)照組，不進(jìn)行運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練。在運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練過程中每周測(cè)量一次所有果蠅的爬行能力以及翅膀表型百分?jǐn)?shù)（患病果蠅會(huì)出現(xiàn)翅膀的異常形態(tài)），并選取一部分果蠅進(jìn)行解剖，取出胸部肌肉進(jìn)行切片處理，使用激光共聚焦顯微鏡拍攝并觀察計(jì)算線粒體聚合情況。三周運(yùn)動(dòng)結(jié)束后再

3、對(duì)所有果蠅進(jìn)行磨漿處理，提取線粒體，測(cè)定每組果蠅的線粒體復(fù)合物I的活性。
　　結(jié)果：1）翅膀表型：開始兩周并沒有發(fā)現(xiàn)對(duì)照組和不運(yùn)動(dòng)組翅膀表型百分?jǐn)?shù)有顯著性差異，在第三周的差異才存在顯著性，尤其是30分鐘組有著非常顯著性差異（P＜0.01）。這說明運(yùn)動(dòng)三周對(duì)患病果蠅的翅膀表型還是存在著作用的。以每天30分鐘運(yùn)動(dòng)量為佳。2）運(yùn)動(dòng)能力：第一周沒有發(fā)現(xiàn)和不運(yùn)動(dòng)組存在的顯著性差異，第二周的30分鐘組和不運(yùn)動(dòng)組具有顯著性差異，第三周30分鐘組

4、有非常顯著性差異（P＜0.01）。這說明運(yùn)動(dòng)三周對(duì)患病果蠅的爬行能力有改善作用。以每天30分鐘運(yùn)動(dòng)量為佳。3）壽命：不運(yùn)動(dòng)組的果蠅只能存活27天，而30分種組平均可以存活33天，60分鐘和90分鐘組平均可以存活30天左右，但都要低于正常的對(duì)照組的壽命。4）激光共聚焦顯微鏡下的線粒體聚集情況：同樣也是30分鐘組的線粒體聚集最少。而60分鐘和90分鐘組以及0分鐘組聚集情況較為明顯。5）線粒體復(fù)合物I的活性：有較為明顯的變化，其中不運(yùn)動(dòng)組的活