過表達(dá)PINK1對SCA3-MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型的線粒體功能保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：脊髓小腦性共濟(jì)失調(diào)3型/馬查多-約瑟夫疾病(spinocerebellarataxia type3/Machado-Joseph disease，SCA3/MJD)，是一種因致病基因MJD1編碼區(qū)內(nèi)CAG異常重復(fù)擴(kuò)增所致的常染色體顯性遺傳的遲發(fā)性神經(jīng)退行性疾病。已知過表達(dá)PINK1蛋白可通過抗氧化穩(wěn)定線粒體挽救帕金森疾病模型，但其在SCA3/MJD疾病模型中的作用尚不清楚。本文旨在探索過表達(dá)PINK1對SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模

2、型的線粒體功能保護(hù)作用。
　　方法：根據(jù)Gal4-UAS系統(tǒng)，本研究利用在果蠅間接飛行肌肉表達(dá)的Mhc-Gal4啟動子表達(dá)致病蛋白質(zhì)片段(MJDtr-Q78)，獲得Mhc-Gal4/UAS系統(tǒng)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型。分別運(yùn)用過表達(dá)PINK1和RNA干擾PINK1干預(yù)SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型，研究其在SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型中的作用。通過對果蠅表型的觀察、果蠅線粒體形態(tài)的觀察、果蠅ATP值的檢測，Real-Tim

3、e PCR檢測PINK1 mRNA表達(dá)水平，分析比較過表達(dá)PINK1和RNA干擾PINK1對SCA3/MJD轉(zhuǎn)基因果蠅模型的影響。
　　結(jié)果：與正常對照組相比，疾病模型組翅膀異常率增高，線粒體呈過度融合狀態(tài)，ATP值降低。與疾病模型組比較，RNA干擾PINK1干預(yù)疾病模型后，果蠅翅膀異常率明顯增高，線粒體呈顯著過度融合狀態(tài)，ATP值明顯降低;過表達(dá)PINK1干預(yù)疾病模型后，果蠅翅膀異常率明顯降低，線粒體清晰、完整，ATP值明顯升高