淫羊藿素(ICT)對Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅的神經(jīng)保護作用及機制研究.pdf

1、目的:
　　初步探討淫羊藿素(ICT)對阿爾茨海默病Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅的神經(jīng)保護作用及可能的作用機制，為阿爾茨海默病的治療提供新的候選藥物。
　　方法:
　　1.構(gòu)建神經(jīng)系統(tǒng)過表達Aβ42蛋白的阿爾茨海默病果蠅模型，并通過表型觀察及HE染色鑒定模型是否構(gòu)建成功。
　　2.通過表型觀察，分別研究ICT對Aβ42轉(zhuǎn)基因雌、雄果蠅生存壽命和爬行能力的影響。
　　3.通過生物化學(xué)指標的測定，分別檢測ICT對Aβ42

2、轉(zhuǎn)基因雌、雄果蠅腦組織超氧化物歧化酶SOD活性、丙二醛MDA含量的影響，探討其是否具有抗氧化作用。
　　4.應(yīng)用反向高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography，RPHPLC)技術(shù)檢測ICT對Aβ42轉(zhuǎn)基因雌、雄果蠅腦組織ATP水平的影響，評價其能否保護線粒體功能。
　　5.通過生物化學(xué)法，檢測ICT對Aβ42轉(zhuǎn)基因雌、雄果蠅腦組織CHE活性的影響，對其機制進行初步探討。
　　結(jié)

3、果:
　　1.通過行為學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)Aβ42轉(zhuǎn)基因雌、雄果蠅與正常果蠅相比爬行運動能力均有降低且壽命縮短。HE染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)，25d模型組雌、雄果蠅腦組織切片神經(jīng)細胞區(qū)域均有大量神經(jīng)元細胞壞死留下的空洞，而同齡正常對照組果蠅則未發(fā)現(xiàn)有明顯的空洞，說明Aβ42轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病果蠅模型構(gòu)建成功。
　　2.ICT(1nmol/L)干預(yù)Aβ42雌、雄果蠅后，其生存壽命及爬行能力相對模型組均有所改善。
　　3.生物化學(xué)指標結(jié)果顯示:

4、Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅模型腦組織SOD活性對比正常果蠅降低，MDA含量則有所升高;而ICT干預(yù)后，與模型組比較，雄性果蠅SOD值提高了25.28％，雌性果蠅SOD值提高了11.34％;雄性果蠅MDA值降低了68.75％，雌性果蠅降低了47.06％。
　　4.應(yīng)用反向高效液相色譜技術(shù)動態(tài)分析(RPHPLC)檢測果蠅腦組織ATP含量發(fā)現(xiàn):中晚期(25d)模型組雌、雄果蠅腦組織ATP較正常對照組含量降低，而模型加藥組較模型組ATP含量明顯增

5、高，雄性果蠅提高了36.26％，雌性果蠅提高了26.70％。
　　5.CHE活性測定值顯示，ICT并不能降低Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅的CHE活力，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1.成功構(gòu)建Aβ42蛋白過表達的轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病果蠅模型。
　　2.ICT能有效延長Aβ42轉(zhuǎn)基因雌、雄果蠅的生存壽命，并改善其爬行能力，具有一定的神經(jīng)保護作用。
　　3.ICT能夠提高Aβ42轉(zhuǎn)基因雌、雄果蠅SOD含量，降低MDA