淫羊藿素(ICT)通過AhR與ER交互應(yīng)答抑制乳腺癌的體外作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的:研究淫羊藿素(Icaritin,ICT)在體外實(shí)驗(yàn)中對芳香烴受體(AhR)的作用及ICT通過激活A(yù)hR進(jìn)而降解ERa蛋白作用,初步探討淫羊藿素是否具有激動(dòng)芳香烴受體的作用和淫羊藿素是否通過芳香烴受體和雌激素受體抑制性交互應(yīng)答抑制人乳腺癌 MCF-7細(xì)胞的增殖的分子機(jī)制。
　　方法:1.人乳腺癌 MCF-7細(xì)胞體外培養(yǎng):體外培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7。2.淫羊藿素對AhR的影響:熒光素酶報(bào)告基因檢測及RT-PCR法檢測淫羊藿素

2、對AhR靶基因CYP1A1的影響,探討淫羊藿素是否具有激動(dòng)AhR的作用。3.淫羊藿素對AhR與ER交互應(yīng)答影響的研究:利用Western-blot法,然后觀察ICT和E2合用時(shí),對MCF-7細(xì)胞的ERa蛋白及細(xì)胞增殖的影響,探討初步ICT是否通過激動(dòng)AhR從而誘導(dǎo)ERa受體蛋白降解進(jìn)而抑制乳腺癌細(xì)胞增殖。
　　結(jié)果:1.熒光素酶檢測結(jié)果顯示 ICT濃度大于等于1μM時(shí)能顯著激動(dòng)AhR的表達(dá)。2.RT-PCR法測定結(jié)果顯示淫羊藿素對

3、AhR靶基因CYP1A1具有激動(dòng)作用。3.Western- blot法檢測結(jié)果顯示1μM ICT與100pM E2合用時(shí)能顯著誘導(dǎo)ERa蛋白降解,且這種結(jié)果能被蛋白酶抑制劑MG逆轉(zhuǎn)。結(jié)論:1.ICT能激動(dòng)AhR靶基因CYP1A1的表達(dá),又具有ERa激動(dòng)作用。2.ICT與 E2合用時(shí),能顯著誘導(dǎo)ERa蛋白降解,且這種作用能被蛋白酶抑制劑 MG逆轉(zhuǎn)。初步探討 ICT能激動(dòng) AhR并通過AhR-ER抑制性交互應(yīng)答抑制E2誘導(dǎo)的MCF-7細(xì)胞增