漢黃芩素體外抗乳腺癌作用研究.pdf

1、癌癥是威脅人類健康的重大疾病，癌癥的分子發(fā)病機(jī)制和生物治療一直以來都是學(xué)者們研究的重點(diǎn)。隨著人們對(duì)癌癥的發(fā)病機(jī)理認(rèn)識(shí)的不斷深入，在以往化學(xué)治療、放射治療、手術(shù)治療三大療法的基礎(chǔ)上，衍生出多種針對(duì)不同發(fā)病機(jī)理的抗癌藥物治療。但由于大多數(shù)抗癌藥物在作用于靶細(xì)胞時(shí)往往涉及正常細(xì)胞，且目前臨床上用于治療腫瘤的化學(xué)藥物都有不同程度的致突變性，因此在治療腫瘤的同時(shí)也增加了病人患第二種腫瘤的可能性，因此目前從天然物質(zhì)中尋找毒副作用小、安全有效的抗癌藥

2、物成為近些年的研究熱點(diǎn)。本論文主要針對(duì)中草藥黃芩中漢黃芩素的提取及其抗腫瘤作用進(jìn)行研究。
　　 本論文從黃芩中提取了漢黃芩素。將黃芩樣品粉碎后，使用95％乙醇在索氏提取器中進(jìn)行回流提取，再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，得到漢黃芩素粗提物。使用制備型HPLC將此粗提物中相應(yīng)組分合并收集并經(jīng)過濾后，再次通過制備型HPLC進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化，收集目的產(chǎn)物，經(jīng)結(jié)晶后得到漢黃芩素純品。
　　 本論文進(jìn)而研究了漢黃芩素對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡

3、的影響，探討其作用機(jī)制。采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞，乳腺癌MCF-7細(xì)胞，前列腺癌PC-3細(xì)胞和子宮頸癌HeLa細(xì)胞的抗腫瘤作用，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)MCF-7細(xì)胞周期分布及bcl-2、bax蛋白含量，并用相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒對(duì)MCF-7細(xì)胞線粒體膜電位和caspase-3的活性進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，漢黃芩素對(duì)四種腫瘤細(xì)胞的增殖均有明顯的抑制作用，但對(duì)于不同組織來源的細(xì)胞其抑制強(qiáng)度不盡相同。40gmo

4、l/L漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞，乳腺癌MCF-7細(xì)胞，前列腺癌PC-3細(xì)胞和子宮頸癌HeLa細(xì)胞24h的抑制率分別為32.74％，51.42％，44.17％和35.63％，且抑制作用隨漢黃芩素濃度的增加和作用時(shí)間的延長而增強(qiáng)，呈現(xiàn)明顯的劑量和時(shí)間依賴關(guān)系。其中，漢黃芩素對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制作用最為顯著，20μmol/L漢黃芩素作用MCF-7細(xì)胞24h，可使其凋亡率達(dá)到33.41％，線粒體膜電位下降56.55％，bcl-2蛋白表達(dá)