Drp1、Marf對線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu)及其功能影響.pdf

1、目的：
　　通過構(gòu)建Drp1（ dynamin-related protein1）、Marf（mitoechondrial assembly regulatory factor）轉(zhuǎn)基因果蠅，探討Drp1、Marf對果蠅間接飛行肌的影響，以及Drp1、Marf對線粒體形態(tài)結(jié)構(gòu)的調(diào)控及其功能影響的相關(guān)性研究。
　　方法：
　　使用MHC-Gal4啟動子，利用經(jīng)典的GAL4/UAS系統(tǒng)，使果蠅線粒體形態(tài)調(diào)控基因Drp1和Ma

2、rf特異性表達于肌肉組織中。通過敲除Drp1和過表達Marf基因干預(yù)調(diào)控其在果蠅肌肉線粒體的表達，改變線粒體的形態(tài)，觀察果蠅翅膀的異常形態(tài)以及飛行能力，并通過透射電子顯微鏡觀察果蠅肌肉組織間接飛行肌肌肉的排列和線粒體的形態(tài)學是否改變。通過ATP試劑盒檢測線粒體ATP產(chǎn)能功能，并進一步應(yīng)用Western Blot蛋白免疫印跡技術(shù)檢測線粒體氧化呼吸鏈復(fù)合物I亞單位NDUFS3蛋白量表達量，來探討Drp1、Marf對線粒體線粒體功能的影響。<

3、br>　　結(jié)果：
　　相比于對照組，通過敲除Drp1和過表達Marf基因均使果蠅間接飛行肌發(fā)生障礙，表現(xiàn)為飛行能力變差，翅膀的異常率增高；電鏡可觀察到Drp1、Marf的轉(zhuǎn)基因果蠅胸部肌肉組織線粒體呈融合狀態(tài)，形態(tài)結(jié)構(gòu)受損，果蠅間接飛行肌肉排列不規(guī)則，肌纖維存在斷裂。線粒體氧化呼吸產(chǎn)生的ATP含量減少以及Western Blot蛋白檢測線粒體氧化呼吸復(fù)合物I亞單位NDUFS3蛋白表達含量均明顯下調(diào)。
　　結(jié)論：
　　敲