涼血活血與益氣活血中藥對放射性肺纖維化防治機(jī)制的研究.pdf

1、目的:模擬臨床放射治療的過程，建立放射性肺纖維化的模型，用涼血活血與益氣活血中藥對其進(jìn)行干預(yù)，通過觀察大鼠肺臟的組織學(xué)改變及相關(guān)細(xì)胞因子的變化，評價涼血活血與益氣活血中藥對放射性肺纖維化的治療作用，并探討其可能存在的作用機(jī)制，以期指導(dǎo)臨床。
　　方法:取80只SD大鼠，體重180-200g，隨機(jī)分成單純照射組（A組），涼血活血組（B組），益氣活血組（C組）和空白對照組（D組），每組20只，雌雄各半。由當(dāng)歸、赤芍、生地、桃仁、麥冬、

2、五味子及甘草組成的涼血活血方和以黃芪、人參、當(dāng)歸、麥冬、五味子及甘草組成的益氣活血方，按傳統(tǒng)煎藥法煎取藥液，以恒溫水浴鍋濃縮成含生藥1.25g/mL的湯劑，真空包裝，4℃冰箱保存。于照射開始時同步灌胃法給藥，B組按12.7g/kg的劑量給藥，C組按14g/kg的劑量給藥，每天一次，A組和D組大鼠同期每天給予1ml/100g生理鹽水灌胃。每天觀察大鼠活動、眼鼻、進(jìn)食、大便等基本情況，每周稱量體重調(diào)整給藥量。A、B、C三組給予每周兩次，每次

3、3Gy劑量的右肺照射，累計照射劑量達(dá)30Gy。于放射開始后第26周對大鼠各部位的血流情況進(jìn)行采集，然后全部處死，腹主動脈采血，用于血清的制備。運(yùn)用細(xì)胞因子定量檢測芯片、信號通路檢測芯片篩選出涼血活血和益氣活血藥治療放射性肺纖維化模型大鼠后相關(guān)因子的改變，篩選出可能的因子。在此基礎(chǔ)上，通過剖胸觀察胸腔及雙肺大體標(biāo)本情況后，取出右肺，透射電鏡觀察Ⅰ、Ⅱ型上皮細(xì)胞，巨噬細(xì)胞等肺泡內(nèi)細(xì)胞及膠原纖維的變化;HE染色、免疫組化染色觀察肺臟病理改變及

4、TLR4/MyD88/NF-kB-IL-1β這一通路中相關(guān)因子的表達(dá)，探討中藥可能的作用機(jī)制，采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　結(jié)果:通過活體觀察發(fā)現(xiàn)，與用藥組相比，單純照射組大鼠精神萎靡、進(jìn)食量減少、活動度降低、鼻周紅赤、眼周黃色分泌物、大便干硬等表現(xiàn)出現(xiàn)較早，且持續(xù)時間較長;用藥組之間相比，在照射初期，涼血活血藥物組大鼠一般狀態(tài)較好，而到后期，益氣活血藥物組則表現(xiàn)較好。模型在活體表現(xiàn)出了初期熱傷血絡(luò)及后期氣陰雙

5、虛的中醫(yī)證候特點(diǎn)。對大鼠各部位血流情況采集結(jié)果發(fā)現(xiàn)，益氣活血藥物組大鼠腹部的血流較旺盛(P＜0.05)，其余三組無明顯差異。大體標(biāo)本觀察發(fā)現(xiàn)，單純照射組肺組織暗紅，表現(xiàn)散在大量蒼白色點(diǎn)灶。用藥組則相對較好，益氣活血組與涼血活血組相比，肺組織表明較平滑。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)單純照射組肺泡腔狹窄明顯，肺間隔充斥著大量的膠原纖維，Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞脫落，并含有少量的漿細(xì)胞。用藥組則相對較好，益氣活血組與涼血活血組相比，其膠原纖維面積相對較小。HE染

6、色結(jié)果表示，與用藥組相比，單純照射組肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，并有大量的膠原纖維沉著，用藥組相對較好。免疫組織化學(xué)法染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)單純照射組TLR4、MyD88、NF-kB及IL-1β的表達(dá)均較高，用藥組之間相比，益氣活血組比涼血活血組表達(dá)較低。
　　結(jié)論:.小劑量多次照射可成功建立放射性肺損傷的模型，模型較穩(wěn)定，具有可重復(fù)性;有利于觀察中醫(yī)證候特點(diǎn)，且這種造模過程符合臨床實(shí)際，實(shí)用性好。
　　應(yīng)用涼血活血和益氣活血中藥對放射性肺纖維化大