益氣活血清金方抗博萊霉素致大鼠肺纖維化作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：基于TGF-β/Smad信號通路初步探究益氣活血清金方抗博萊霉素致大鼠纖維化生物學(xué)作用機(jī)制。
　　方法：采用體重200±20g的SD雄性大鼠96只隨機(jī)分為空白對照組（K）、模型組（BLM）、陽性對照組（P）、益氣活血清金方中藥組（Y），每組24只，每籠8只。除K組外其余各組均采用一次性氣管注射博來霉素（5mg/kg）法誘導(dǎo)肺纖維化模型，K組采用一次性氣管注射生理鹽水（5mg/kg）作為對照。K和BLM組每天生理鹽水（10g/

2、kg·d）灌胃，P組用強(qiáng)的松（4.2mg/kg·d）灌胃，Y組用益氣活血清金方（9.45g/kg·d）灌胃，于實(shí)驗(yàn)第7、14、28天分三批次處死動物，股動脈采血分離血清，用放射免疫法檢測PCⅢNP、CⅣ、HA、LN；取肺組織做HE、Masson染色，免疫組化半定量法分析CⅠ、TGF-βRI、TGF-βRII、Smad3、Smad7含量，RT-PCR法分析TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA表達(dá)量。
　

3、　結(jié)果：BLM組相關(guān)檢測指標(biāo)與K組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在促進(jìn)體重增加、防止肺濕重過度增加、改善大鼠肺系數(shù)等方面Y組與BLM組相比可有顯著性差異（P<0.05）。HE染色病理結(jié)果顯示：在第28天時Y組與BLM組相比無明顯纖維瘢痕形成。Masson染色結(jié)果顯示：各時間點(diǎn)Y組代表膠原沉積的藍(lán)染區(qū)明顯比BLM組面積少，且顏色淺淡。放射免疫法檢測PCⅢNP、CⅣ、HA、LN的結(jié)果：中、后期Y組與BLM組相比均有統(tǒng)計(jì)意義（P<0.0

4、5）。免疫組化法檢測CⅠ、TGF-βRI、TGF-βRII、Smad3、Smad7平均積分光密度值（MIOD）結(jié)果：Y組與BLM組CⅠ、TβRI、TβRII、Smad3、Smad7的MIOD相比除TGF-βRⅠ第7、14天，Smad7第7天沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其它比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。RT-PCR法檢測TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA結(jié)果：Y組與BLM組除Smad3、Smad7mRNA第7天比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其它