肝素對(duì)博萊霉素所致大鼠肺纖維化作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的:觀察肝素對(duì)博來霉素誘導(dǎo)肺纖維化大鼠的保護(hù)作用并探討其相關(guān)作用機(jī)制。
　　 方法：66只清潔級(jí)雄性Wistar大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組1(18只)后面叫A組,治療組2(12只)后面叫B組,模型組(18只)后面叫C組,正常對(duì)照組(18只)后面叫D組。博來霉素氣管內(nèi)注射復(fù)制大鼠肺纖維化模型。在第7天,14天和28天分批處死大鼠。肺泡灌洗液行HE染色進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分類計(jì)數(shù),病理切片行HE染色以判斷其病理?yè)p傷程度。酶聯(lián)免疫吸附法(E

2、LISA)測(cè)定血清,灌洗液中組織型纖溶酶元激活劑(t-PA),纖溶酶元激活物抑制劑-1(PAI-1)的含量。
　　 結(jié)果:
　　 1、細(xì)胞總分?jǐn)?shù)灌注博萊霉素各組動(dòng)物BALF中的細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)均有明顯升高,巨噬細(xì)胞分類計(jì)數(shù)有所下降;藥物干預(yù)各組的細(xì)胞總數(shù)明顯低于博萊霉素組,因此其中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)也低于博萊霉素組。
　　 2、肺組織HE染色
　　 (1)肺切片HE染色肺纖維化評(píng)分:A組

3、第7天的肺纖維化評(píng)分為0.33+0.52,第14天的肺纖維化評(píng)分為1.00±0.89,第28天的肺纖維化評(píng)分為0.83±0.75;B組第14天的肺纖維化評(píng)分為0.83±0.75,第28天的肺纖維化評(píng)分為1.00±0.63;C組第7天的肺纖維化評(píng)分為0.83+0.75,第14天的肺纖維化評(píng)分為2.17±0.75,第28天的肺纖維化評(píng)分為1.67±0.52;D組第7天的評(píng)分為0.00±0.00第14天的評(píng)分為0.00±0.00,第28天的評(píng)

4、分為0.00±0.00。第7天時(shí),A組肺纖維化評(píng)分與C組、D組比較無明顯差異。第14天時(shí),A組、B組的肺纖維化評(píng)分明顯低于C組,明顯高于D組,A、B組之間肺纖維化評(píng)分無明顯差異,C組肺纖維化評(píng)分明顯高于D組。第28天時(shí),A組肺纖維化評(píng)分明顯低于C組,明顯高于D組,B組肺纖維化評(píng)分和C組比較無明顯差異,明顯高于D組,A、B組之間比較差別不顯著。
　　 (2)肺切片HE染色肺泡炎評(píng)分:A組第7天的肺泡炎評(píng)分是1.67±0.83,第1

5、4天的肺泡炎評(píng)分是1.33±0.52,第28天的肺泡炎評(píng)分是0.83±0.41,B組第14天的肺泡炎評(píng)分是1.50±0.55,第28天的肺泡炎評(píng)分是0.83±0.41,C組第7天的肺泡炎評(píng)分是2.33±0.52,第14天的肺泡炎評(píng)分是1.33±0.52,第28天的肺泡炎評(píng)分是1.00±0.63,D組第7天的肺泡炎評(píng)分是0.33±0.52,第14天的肺泡炎評(píng)分是0.00±0.00,第28天的肺泡炎評(píng)分是0.00±0.00。第7天時(shí),A組C

6、組D組之間分別有明顯差異,第14天時(shí),A組B組C組之間無明顯差異,D組和A.B.C組之間均有明顯差異,第28天時(shí),A組B組C組之間無明顯差異,D組和A.B.C組之間均有明顯差異。
　　 3、ELISA檢測(cè)
　　 (1)血清中t-PA(μg/l):A組7天時(shí)22.88±2.60,14天時(shí)17.40±2.09,28天時(shí)18.30±2.06;B組14天時(shí)17.10±2.15,28天時(shí)18.17±2.91;C組,7天時(shí)16.02

7、±2.53,14天時(shí)14.25±1.90,28天時(shí)12.97±2.94;D組,7天時(shí)15.85±2.97,14天時(shí)14.53±2.27,28天時(shí)15.04±2.05。7,14,28天點(diǎn)時(shí),A組和C組D組比較有顯著差異；B組和C組D組間有顯著差異；A組和B組之間,C組和D組之間沒有顯著性差異;
　　 (2)BALF中標(biāo)化后的t-PA(用萬(wàn)分之幾表示):A組7天時(shí)0.85±0.44,14天時(shí)0.88±0.38,28天時(shí)0.77±.0

8、.22;B組14天時(shí)0.70±0.41,28天時(shí)0.75±0.23;C組7天時(shí)0.47±0.33,14天0.37±0.16,28天0.39±0.12;D組7天時(shí)0.39±0.03,14天時(shí)0.36±07,28天時(shí)0.32±0.04。7,14,28天點(diǎn)時(shí),A組和C組D組間有顯著差異,B組和C組D組間有顯著差異,A組和B組之間,C組和D組之間沒有顯著性差異；
　　 (3)血清中PAI-1(ng/l):A組7天時(shí)852.29±224.

9、21,14天時(shí)764.79±185.02,28天時(shí)1283.00±410.39,B組14天時(shí)845.00±127.97,28天時(shí)1009.80±172.65,C組7天時(shí)1471.80±385.80,14天時(shí)1552.00±241.34,28天時(shí)1624.20±468.40,D組7天時(shí)1053.10±125.37,14天時(shí)860.88±168.55,28天時(shí)916.90±107.59,在7,14,28時(shí)點(diǎn)時(shí),C組與A組,B組以及D組之間比

10、較均有顯著差異；A組,B組,D組之間比較均無顯著差異;
　　 (4)BALF中PAI-1(用萬(wàn)分之幾×10-3表示)A組7天時(shí)29.31±5.32,14天時(shí)35.19±10.17,28天時(shí)32.31±16.20,B組14天時(shí)24.77±11.70,28天時(shí)36.56±11.29,C組7天時(shí)44.80±0.72,14天時(shí)55.49±23.29,28天時(shí)50.93±20.53,D組7天時(shí)21.57±6.70,14天時(shí)21.75±5.

11、92,28天時(shí)21.01±4.22,在7,14,28時(shí)點(diǎn)時(shí),C組與A組,B組以及D組之間比較均有顯著差異,A組,B組,D組之間比較均無顯著差異。
　　 結(jié)論：
　　 1、A組和B組的纖維化程度,灌洗液細(xì)胞總分?jǐn)?shù)以及血清和灌洗液中t-PA和PAI-1均無明顯差異,這說明在肺纖維化過程中雖然有炎癥過程參與,但是抗炎治療并沒有很直接的效果。
　　 2、肝素通過調(diào)節(jié)t-PA,PAI-1之間的平衡進(jìn)而調(diào)節(jié)抗凝纖溶系統(tǒng)而減少