α-常春藤皂苷元的開發(fā)利用及其衍生物的設計、合成與抗菌活性的研究.pdf

1、目前，細菌感染性疾病仍然嚴重威脅著人類健康，亟需研發(fā)新型抗菌候選藥物。天然產物具有來源廣泛、結構新穎、毒性低等特點，將天然產物作為先導化合物，進行結構改造和修飾，從中尋找具有生物活性的新藥已成為現代藥物研究發(fā)展的一個重要方向。α-常春藤皂苷元（α-Hederagenin）為齊墩果烷型五環(huán)三萜，是齊墩果酸的衍生物，α-常春藤皂苷元已被證實具有保肝、抗菌、抗癌、抗抑郁和抗炎等多種生物活性。目前為止，有關α-常春藤皂苷元的結構修飾與改造的研究

2、報道很少。
　　本論文對中華常春藤藥粉進行提取、降解、分離得到α-常春藤皂苷元，并研究了其體外抗菌活性、細胞毒活性、與卡那霉素聯合用藥的體外協同抗菌作用和體內抗菌活性。實驗結果顯示，α-常春藤皂苷元在對抗革蘭氏陽性菌和協同抗菌方面表現出了良好的生物活性，同時，沒有明顯的細胞毒作用，安全性較高。但是由于其水溶性較差，限制了抗菌作用的發(fā)揮。為此，課題組一方面設計并制備了α-常春藤皂苷元的脂質體劑型，以期改善α-常春藤皂苷元的水溶性，提

3、高其體內生物利用度；另一方面，我們參考相關文獻及新藥設計的原理，對其進行結構優(yōu)化，設計合成了一系列新的衍生物，最后對目標化合物進行抗菌活性測試，并對部分化合物進行了細胞毒測定。期望得到高效低毒副作用的新型候選化合物?；瘜W合成研究內容為：
　　我們以α-常春藤皂苷元為原料，經過一系列反應，保護28-羧基，對α-常春藤皂苷元的A環(huán)進行結構改造，得到兩個目標化合物HA和HB作為先導化合物。我們通過在3-位引入肟基，得到目標化合物HC。先

4、導化合物HA和HB，和不同的酸酐進行連接，得到第一系列目標化合物5～8。先導化合物 HA和HB，以酸酐為連接基團與苯二胺和多胺化合物EDCI拼接，得到第二系列目標化合物9～14。先導化合物HA和HB，以酸酐為連接基團與含芳香基團硝酸酯型NO供體側鏈拼接，得到第三系列目標化合物15～22。α-常春藤皂苷元保護28-羧基后得到化合物1，化合物1、HA和HB，直接與直鏈硝酸酯型NO供體側鏈拼接，得到第四系列目標化合物23～28。目標化合物共計

5、25個，結構均經1H-NMR、13C-NMR、MS或HR-MS確證，均是未見報道的新化合物。
　　薄膜分散法制備的α-常春藤皂苷元脂質體平均粒徑為48.5 nm，zeta電位的平均值為-11.08 mV，HPLC測得包封率為80.3％。脂質體粒徑與包封率良好，zeta電位絕對值低于穩(wěn)定長期儲存的標準電位，制備α-常春藤皂苷元脂質體的最優(yōu)條件還有待進一步完善。
　　在體外L-半胱氨酸存在下，分別對20個NO供體型化合物進行10

6、0μmol·L-1，500μmol·L-1兩個濃度下NO釋放量的測定，結果顯示，此類衍生物在體外NO釋放量具有顯著的濃度依賴性，其中化合物15，17，21表現出較強的NO釋放量(A>0.35)，第四系列化合物在500μmol·L-1和100μmol·L-1下，NO釋放結果均表明側鏈較短的衍生物NO釋放量較大。
　　體外抗菌活性采用S.aureus，B.sub，E.coli，P.aer，A.baum五種常見的革蘭氏陽性菌和陰性菌進行

7、，計算最小抑菌濃度。結果顯示：化合物對革蘭氏陽性菌表現出的抗菌作用強于革蘭氏陰性菌。衍生物中活性較好的化合物具有羧基或多胺類側鏈，其中化合物5對B. sub168的MIC達到4μg·mL-1。此外，本論文選擇抗菌活性較好的兩個化合物進行了細胞毒活性測定，結果顯示，化合物13在對 B.sub的MIC為16μg·mL-1時具有細胞毒活性。化合物5在1.25μM，2.5μM，5μM，10μM四個濃度下沒有顯示細胞毒性。
　　本論文共設計

8、合成了四個系列的目標化合物，其中首次報道的新目標化合物25個，其結構均經1H-NMR、13C-NMR、MS或HR-MS確證。對α-常春藤皂苷元和目標化合物體外常見致病菌種的抗菌活性進行了篩選，同時，對α-常春藤皂苷元進行了協同抗菌、細胞毒活性和初步體內抗菌活性研究，此外，我們設計并制備了α-常春藤皂苷元的脂質體劑型，并測定了其部分理化性質，初步符合脂質體劑型要求。完成了五環(huán)三萜類α-常春藤皂苷元的結構修飾及衍生物抗菌活性的初步研究。獲得