MUC1在IL-13影響的人支氣管上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子GM-CSF中的作用.pdf

1、粘蛋白1（MUC1）是一種廣泛表達(dá)于各種粘膜上皮細(xì)胞和造血干細(xì)胞表面的跨膜糖蛋白,主要分布于呼吸道、胃腸道、泌尿生殖道和乳腺等上皮組織，被認(rèn)為具有保護(hù)、潤(rùn)滑、免疫調(diào)節(jié)等多項(xiàng)功能。既往研究表明在各種細(xì)菌或病毒所致呼吸道感染與炎癥中，MUC1可能發(fā)揮重要作用。在哮喘發(fā)病機(jī)制中，氣道上皮細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞之間存在著的交互對(duì)話作用，氣道上皮細(xì)胞分泌GM-CSF、TSLP等細(xì)胞因子激活樹突狀細(xì)胞，從而介導(dǎo)了哮喘的Th2免疫應(yīng)答。但MUC1是否參與調(diào)

2、節(jié)哮喘氣道上皮的功能尚未見報(bào)道。
　　目的：
　　探究MUC1在IL-13影響的人支氣管上皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子GM-CSF中的作用
　　方法：
　　1．分別以不同濃度的IL-13（0，20，40，60ng/ml）刺激人支氣管上皮（16HBE）細(xì)胞24小時(shí)。ELISA法分別檢測(cè)各組上清中細(xì)胞因子GM-CSF的濃度。
　　2．以MUC1 siRNA沉默16HBE的MUC1表達(dá)，然后IL-13（20ng/ml）刺激

3、細(xì)胞24小時(shí)。實(shí)驗(yàn)分為6組。1組：正常對(duì)照；2組：Scrambled siRNA轉(zhuǎn)染；3組：MUC1 siRNA轉(zhuǎn)染；4組：IL-13；5組：Scrambled siRNA轉(zhuǎn)染+IL-13；6組：MUC1 siRNA轉(zhuǎn)染+IL-13。Western Blot檢測(cè)各組MUC1蛋白的表達(dá)；ELISA法分別檢測(cè)各組上清中細(xì)胞因子GM-CSF的濃度。
　　結(jié)果：
　　1．16HBE能分泌GM-CSF；與未受刺激細(xì)胞比較，IL-13可

4、降低16HBE分泌GM-CSF（p<0.05）；
　　不同濃度的IL-13（20，40，60ng/ml）刺激后，16HBE分泌GM-CSF的量無明顯差異。（p>0.05）。
　　2．以20ng/ml的IL-13刺激16HBE細(xì)胞24h，細(xì)胞表達(dá)的MUC1蛋白較對(duì)照組下降（p<0.05）。
　　3．采用MUC1 siRNA抑制16HBE細(xì)胞的MUC1表達(dá)，該組GM-CSF的分泌量較相應(yīng)照組顯著減少（p<0.01）。