Adiponectin AS lncRNA對前體脂肪細胞分化的作用及調(diào)控機制.pdf

1、長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA，lncRNA）是一類在基因表達過程中具有重要調(diào)控作用的非編碼RNA，其可通過不同的作用方式參與多種生物學過程。脂肪組織的特異性分泌因子脂聯(lián)素(Adiponectin)在前體脂肪細胞的分化和機體的正常代謝中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，其表達受轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后調(diào)控;本研究通過生物信息軟件預測了轉(zhuǎn)錄自脂聯(lián)素基因反義鏈上的Adiponectin AS lncRNA的存在，探究了其對小鼠原代前體脂肪細

2、胞分化的作用及機制，并研究了其對小鼠代謝的影響。
　　本文首先應運生物軟件分析了Adiponectin AS lncRNA的編碼能力;通過RT-PCR鑒定了其在小鼠脂肪組織的轉(zhuǎn)錄;其次，利用RT-qPCR研究了其在小鼠不同組織和3T3-L1細胞系分化過程中的表達和半衰期;再通過FISH等技術(shù)確定了其在細胞中的定位;通過構(gòu)建Adiponectin AS lncRNA腺病毒過表達載體侵染小鼠原代前體脂肪細胞，利用RT-qPCR、WB、

3、油紅O染色等技術(shù)研究了其對前體脂肪細胞分化的作用;再利用RPA等技術(shù)探究了Adiponectin AS lncRNA的作用機制;最后，利用過表達Adiponectin AS lncRNA的腺病毒注射C57BL/6小鼠，通過GTT、ITT、ELISA、RT-qPCR、TG檢測等技術(shù)檢測了其對小鼠糖、脂代謝的影響。獲得的主要研究結(jié)果如下：
　　1.Adiponectin AS lncRNA在小鼠心臟、肝臟、脾臟、腦、腎臟、肌肉和脂肪中

4、均有表達，其在脂肪、肝臟及脾臟表達量相對較高;在3T3-L1成脂分化過程中，Adiponectin AS lncRNA的表達量隨著分化的進行逐漸升高，在分化后期趨于穩(wěn)定;
　　2.Adiponectin AS lncRNA在前體脂肪細胞的核和質(zhì)中均有分布，成熟脂肪細胞中熒光探針在細胞質(zhì)中的熒光強度要高于細胞核中的熒光強度，Adiponectin AS lncRNA在脂肪細胞的分化過程中出現(xiàn)了由核到質(zhì)的轉(zhuǎn)移;
　　3.過表達A

5、diponectin AS lncRNA顯著抑制前體脂肪細胞成脂分化，下調(diào)成脂標志基因PPARγ、adiponectin和aP2mRNA及蛋白的表達(P＜0.05);Adiponectin AS lncRNA與Adiponectin mRNA通過堿基互補配對形成內(nèi)源性的RNA二聚體，抑制Adiponectin mRNA的翻譯;
　　4.在高脂飼喂組，用表達全長和非重疊區(qū)的Adiponectin AS lncRNA腺病毒處理會降低小

6、鼠的采食量，其脂肪的重量也顯著低于對照組(P＜0.05);非重疊區(qū)Adiponectin AS lncRNA腺病毒處理組與對照組及全長的Adiponectin AS lncRNA腺病毒處理組相比，其葡萄糖耐受性和胰島素敏感性更強;處理組小鼠的肝臟、肌肉、血液中甘油三酯的含量要顯著低于對照組(P＜0.05);處理組血液中的脂聯(lián)素含量與對照組無顯著差異，但處理組血液中瘦素的含量卻顯著低于對照組(P＜0.05)。
　　綜上所述，Adip