苗藥組方對COPD大鼠氣道及肺組織c-myc表達(dá)的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究目的:通過觀察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠氣道重塑模型及正常大鼠氣道及肺組織原癌(C-myc)基因mRNA、蛋白表達(dá)的變化,來探討C-myc基因與氣道重塑的關(guān)系;并用苗藥組方對COPD大鼠氣道重塑進(jìn)行干預(yù),為臨床上治療慢阻肺提供新的治療方向。
  研究方法:
  1.80只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組(20只)、模型組(60只)。模型組大鼠:COPD造模參考宋一平造模方法,采用熏香煙聯(lián)合氣道內(nèi)滴注脂多糖(LPS)法

2、構(gòu)建,分別于第1天、第14天經(jīng)氣管注入LPS200ug/ul,第2-13天、第15-28天煙熏0.5h,共28d。COPD模型組經(jīng)造模成功后,再隨機(jī)再分為COPD模型組(20只)、苗藥組方干預(yù)組(20只)、地塞米松治療組(20只),苗藥組方干預(yù)組大鼠于造模成功后給予苗藥組方煎劑灌胃治療,每天2次,每次2ml,地塞米松治療組大鼠腹腔注射地塞米松,1mg/kg/天,療程為30天,上述大鼠分別在造模后各處死6只,處死大鼠后,收集標(biāo)本,取大鼠氣

3、道及肺組織組織進(jìn)行HE染色,并觀察其余各組大鼠的一般狀態(tài)。
  2.分別運(yùn)用實(shí)時熒光定量法(real-time PCR)進(jìn)行正常對照組、COPD模型組、苗藥組方干預(yù)組、地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細(xì)胞C-myc mRNA含量測定。
  3.用免疫組化法檢測正常對照組、COPD模型組、苗藥組方干預(yù)組、地塞米松治療組大鼠氣道及肺組織中原癌蛋白的表達(dá)情況。
  4.用ELISA法檢測正常對照組、COPD模型組、苗藥組方干預(yù)組

4、、地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細(xì)胞上清液中TGF-β1與PDGF的濃度。
  結(jié)果:
  1.COPD模型組大鼠開始出現(xiàn)氣道壁及平滑肌增厚,氣道上皮受損,部分纖毛脫落,氣道周圍及肺泡間隔內(nèi)有大量炎癥細(xì)胞浸潤,大鼠支氣管管腔相對變窄,部分肺泡破壞、融合,肺泡腔擴(kuò)大;苗藥組方干預(yù)組及地塞米松治療組與COPD模型組相比,氣道管腔狹窄程度和肺泡結(jié)構(gòu)破壞程度有減輕。
  2.實(shí)時熒光定量PCR(real-time PCR)結(jié)果顯

5、示:與正常對照組相比較,COPD模型組大鼠氣道成纖維細(xì)胞C-Myc基因mRNA較正常對照組有顯著的增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與COPD模型組相比,苗藥組方干預(yù)組及地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細(xì)胞原癌基因mRNA的表達(dá)量明顯降低。免疫組化結(jié)果顯示:COPD模型組大鼠氣道及肺組織C-Myc蛋白較正常對照組有顯著地增加。與COPD模型組相比,苗藥組方干預(yù)組及地塞米松治療組大鼠氣道及肺組織原癌蛋白的陽性表達(dá)率明顯降低。
  3.酶聯(lián)免疫(EL

6、ISA)結(jié)果顯示:與正常對照組相比較,COPD模型組大鼠氣道成纖維細(xì)胞上清液中轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β1)及血小板衍生因子(PDGF)的濃度顯著高于正常對照組,苗藥組方干預(yù)組及地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細(xì)胞上清液中TGF-β1及PDGF的濃度顯著低于COPD模型組,其中苗藥組方干預(yù)組與地塞米松治療組大鼠氣道成纖維細(xì)胞上清液中TGF-β1及PDGF的濃度相比較,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
  結(jié)論:
  1.COPD大鼠氣道重塑這一病

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