補(bǔ)腎苗藥雙腎草對(duì)肺腎陽(yáng)虛型COPD大鼠HPA軸的干預(yù)及臨床觀察.pdf

1、目的：
　　1.臨床部分:將符合標(biāo)準(zhǔn)的肺腎陽(yáng)虛型COPD患者隨機(jī)分為三組，同步觀察比較雙腎草治療組和舒利迭治療組治療前后對(duì)患者肺功能、血?dú)夥治?、肝功能、腎功能及臨床癥狀改善情況。旨在以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，尋找民族醫(yī)藥，改善患者病情，提高生活質(zhì)量，減少不良反應(yīng)，為臨床運(yùn)用提供依據(jù)。
　　2.實(shí)驗(yàn)部分:通過(guò)肺腎陽(yáng)虛COPD大鼠的造模和檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，旨在研究苗藥雙腎草，對(duì)肺腎陽(yáng)虛COPD大鼠HPA軸的干預(yù)而調(diào)節(jié)肺腎陽(yáng)虛COPD大鼠下丘

2、腦-垂體-腎上腺軸功能，并能抑制炎性轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，改善肺腎陽(yáng)虛COPD大鼠肺組織破壞程度，為臨床運(yùn)用提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.臨床部分
　　(1)資料:選擇貴陽(yáng)中醫(yī)二附院呼吸科門(mén)診就診患者，從2013年1月到2014年12月來(lái)院就診患者。例數(shù)為60例。所有選擇的病例均滿足納入標(biāo)準(zhǔn)，且符合中醫(yī)辯證為肺腎陽(yáng)虛型。隨機(jī)分為肺腎陽(yáng)虛COPD對(duì)照組、沙美特羅替卡松治療組和雙腎草治療組。每組患者各20例。三組患者在年齡

3、、性別，以及治療前肺功能、血?dú)夥治?、癥狀評(píng)分等方面比較無(wú)明顯差異，具有可比性(P＞0.05)。
　　(2)治療方法:三組給予相同的“吸氧、止咳、化痰”等一般基礎(chǔ)治療。肺腎陽(yáng)虛型COPD對(duì)照組患者除一般基礎(chǔ)治療之外不做其他特殊治療。沙美特羅替卡松治療組在一般基礎(chǔ)治療上加沙美特羅替卡松吸入劑，規(guī)格50/250ug*60吸，每日分別早上、睡覺(jué)前一吸，用藥后漱口。由葛蘭素史克制藥公司生產(chǎn)。雙腎草治療組也在一般基礎(chǔ)治療上加雙腎草根莖為藥，藥

4、材均購(gòu)自貴州永博鑫公司，正規(guī)途徑購(gòu)買(mǎi)。雙腎草每日30g熬成湯劑約300ml，每次口服100ml，一日三次溫服。
　　(3)觀察項(xiàng)目:觀察各組治療前后肺功能情況、血?dú)夥治銮闆r及臨床癥狀綜合評(píng)分表的情況。
　　2.實(shí)驗(yàn)部分
　　(1)造模:選取SD雄性大鼠80只，隨機(jī)分為正常組和COPD模型組，正常組20只，COPD模型組60只，COPD模型組大鼠造模，以LPS注入氣管聯(lián)合香煙煙熏的方法造COPD模型。60只COPD模型組

5、大鼠在制備COPD模型一個(gè)月后，以醋酸氫化可的松皮下注射的方法二次造模，制備肺腎陽(yáng)虛COPD大鼠模型。
　　(2)治療:60只肺腎陽(yáng)虛型COPD大鼠隨機(jī)分為三組，肺腎陽(yáng)虛型COPD對(duì)照組，地米治療組，雙腎草治療組，每組各20只。地米治療組采用地塞米松0.1mg/100g灌胃;雙腎草治療組以雙腎草根莖為藥，水煎后予0.025ml/g灌胃。肺腎陽(yáng)虛COPD模型組以0.4ml/g無(wú)菌生理鹽水灌胃，三組療程各15天。
　　(3)造模

6、結(jié)果檢測(cè):通過(guò)各組大鼠一般情況（癥狀、體征）比較以及取肺組織外觀比較、HE染色病理切片鏡下觀，出現(xiàn)典型COPD模型的肺組織結(jié)構(gòu)變化。提示造模成功。
　　(4)ELISA試劑盒定量檢測(cè)四組大鼠血清中CRH、ACTH、CORT治療前后的濃度。
　　(5)觀察正常組、肺腎陽(yáng)虛COPD對(duì)照組、及雙腎草治療組、地米治療組治療后大鼠肺組織HE染色病理切片的肺組織結(jié)構(gòu):Envision法免疫組化染色觀察炎性轉(zhuǎn)錄因子NF-KB p65的表達(dá)

7、。
　　(6)取正常組、肺腎陽(yáng)虛型COPD對(duì)照組、及各治療組治療后的大鼠肺組織、下丘腦、腎上腺組織，用real-time PCR方法檢測(cè)四組大鼠肺組織中GR mRNA、下丘腦中CORT mRNA、腎上腺中CRH mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　通過(guò)研究我們發(fā)現(xiàn)，苗藥雙腎草能抑制炎性轉(zhuǎn)錄因子NF-KB p65的表達(dá)，NF-KBp65在模型組表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性，在雙腎草治療組表達(dá)要弱于地塞米松治療組。苗藥雙腎草能提高肺腎陽(yáng)虛型

8、COPD大鼠血清中ACTH、CORT、CRH的濃度，其濃度高于地米治療組。雙腎草組中CORT mRNA表達(dá)量、CRH mRNA、GRmRNA表達(dá)量均高于地米組。且雙腎草治療組和沙美特羅替卡松治療組相比能更好的改善肺腎陽(yáng)虛型COPD患者的臨床癥狀。
　　結(jié)論:
　　苗藥雙腎草可以通過(guò)對(duì)HPA（下丘腦-垂體-腎上腺軸）軸的干預(yù)起到抗炎作用，和糖皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素聯(lián)合支氣管舒張劑相比較，療效略強(qiáng)于后者，且雙腎草副作用更小，在臨床