補腎苗藥雙腎草對肺腎陽虛型COPD大鼠HPA軸的干預(yù)及臨床觀察.pdf

1、目的：
　　1.臨床部分:將符合標(biāo)準(zhǔn)的肺腎陽虛型COPD患者隨機分為三組，同步觀察比較雙腎草治療組和舒利迭治療組治療前后對患者肺功能、血氣分析、肝功能、腎功能及臨床癥狀改善情況。旨在以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，尋找民族醫(yī)藥，改善患者病情，提高生活質(zhì)量，減少不良反應(yīng)，為臨床運用提供依據(jù)。
　　2.實驗部分:通過肺腎陽虛COPD大鼠的造模和檢測相關(guān)指標(biāo)，旨在研究苗藥雙腎草，對肺腎陽虛COPD大鼠HPA軸的干預(yù)而調(diào)節(jié)肺腎陽虛COPD大鼠下丘

2、腦-垂體-腎上腺軸功能，并能抑制炎性轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，改善肺腎陽虛COPD大鼠肺組織破壞程度，為臨床運用提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.臨床部分
　　(1)資料:選擇貴陽中醫(yī)二附院呼吸科門診就診患者，從2013年1月到2014年12月來院就診患者。例數(shù)為60例。所有選擇的病例均滿足納入標(biāo)準(zhǔn)，且符合中醫(yī)辯證為肺腎陽虛型。隨機分為肺腎陽虛COPD對照組、沙美特羅替卡松治療組和雙腎草治療組。每組患者各20例。三組患者在年齡

3、、性別，以及治療前肺功能、血氣分析、癥狀評分等方面比較無明顯差異，具有可比性(P＞0.05)。
　　(2)治療方法:三組給予相同的“吸氧、止咳、化痰”等一般基礎(chǔ)治療。肺腎陽虛型COPD對照組患者除一般基礎(chǔ)治療之外不做其他特殊治療。沙美特羅替卡松治療組在一般基礎(chǔ)治療上加沙美特羅替卡松吸入劑，規(guī)格50/250ug*60吸，每日分別早上、睡覺前一吸，用藥后漱口。由葛蘭素史克制藥公司生產(chǎn)。雙腎草治療組也在一般基礎(chǔ)治療上加雙腎草根莖為藥，藥

4、材均購自貴州永博鑫公司，正規(guī)途徑購買。雙腎草每日30g熬成湯劑約300ml，每次口服100ml，一日三次溫服。
　　(3)觀察項目:觀察各組治療前后肺功能情況、血氣分析情況及臨床癥狀綜合評分表的情況。
　　2.實驗部分
　　(1)造模:選取SD雄性大鼠80只，隨機分為正常組和COPD模型組，正常組20只，COPD模型組60只，COPD模型組大鼠造模，以LPS注入氣管聯(lián)合香煙煙熏的方法造COPD模型。60只COPD模型組

5、大鼠在制備COPD模型一個月后，以醋酸氫化可的松皮下注射的方法二次造模，制備肺腎陽虛COPD大鼠模型。
　　(2)治療:60只肺腎陽虛型COPD大鼠隨機分為三組，肺腎陽虛型COPD對照組，地米治療組，雙腎草治療組，每組各20只。地米治療組采用地塞米松0.1mg/100g灌胃;雙腎草治療組以雙腎草根莖為藥，水煎后予0.025ml/g灌胃。肺腎陽虛COPD模型組以0.4ml/g無菌生理鹽水灌胃，三組療程各15天。
　　(3)造模

6、結(jié)果檢測:通過各組大鼠一般情況（癥狀、體征）比較以及取肺組織外觀比較、HE染色病理切片鏡下觀，出現(xiàn)典型COPD模型的肺組織結(jié)構(gòu)變化。提示造模成功。
　　(4)ELISA試劑盒定量檢測四組大鼠血清中CRH、ACTH、CORT治療前后的濃度。
　　(5)觀察正常組、肺腎陽虛COPD對照組、及雙腎草治療組、地米治療組治療后大鼠肺組織HE染色病理切片的肺組織結(jié)構(gòu):Envision法免疫組化染色觀察炎性轉(zhuǎn)錄因子NF-KB p65的表達(dá)

7、。
　　(6)取正常組、肺腎陽虛型COPD對照組、及各治療組治療后的大鼠肺組織、下丘腦、腎上腺組織，用real-time PCR方法檢測四組大鼠肺組織中GR mRNA、下丘腦中CORT mRNA、腎上腺中CRH mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　通過研究我們發(fā)現(xiàn)，苗藥雙腎草能抑制炎性轉(zhuǎn)錄因子NF-KB p65的表達(dá)，NF-KBp65在模型組表達(dá)呈強陽性，在雙腎草治療組表達(dá)要弱于地塞米松治療組。苗藥雙腎草能提高肺腎陽虛型

8、COPD大鼠血清中ACTH、CORT、CRH的濃度，其濃度高于地米治療組。雙腎草組中CORT mRNA表達(dá)量、CRH mRNA、GRmRNA表達(dá)量均高于地米組。且雙腎草治療組和沙美特羅替卡松治療組相比能更好的改善肺腎陽虛型COPD患者的臨床癥狀。
　　結(jié)論:
　　苗藥雙腎草可以通過對HPA（下丘腦-垂體-腎上腺軸）軸的干預(yù)起到抗炎作用，和糖皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素聯(lián)合支氣管舒張劑相比較，療效略強于后者，且雙腎草副作用更小，在臨床