兩種微藻基因工程選擇標(biāo)記的研究及脂肪酸分析.pdf

1、隨著人口增長,經(jīng)濟(jì)發(fā)展,微藻成為最具潛力的食品和生物能源原料。本文主要分析斜生柵藻和舟形藻的脂肪酸組成及含量,研究兩種微藻的基因工程選擇標(biāo)記,從而為通過基因工程手段培育優(yōu)良藻種奠定基礎(chǔ)。
　　 我們通過GC-MS測了兩種藻中的脂肪酸組成和含量。斜生柵藻中檢測到的飽和脂肪酸主要為14:0、16:0和18:0,其百分含量分別為5.24％、21.94％、1.94％；單不飽和脂肪酸主要為16:1和18:1,其百分含量分別為44.08％、

2、6.99％；多不和脂肪酸為20:5(EPA),其百分含量為19.81％。其中16:0、16:1和EPA含量較高。舟形藻中飽和脂肪酸14:0、16:0的百分含量分別為0.38％、64.13％,多不飽和脂肪酸16:3和20:5的百分含量分別為15.87％、19.62％,其中16:0脂肪酸含量最高,16:3和EPA兩種多不飽和脂肪酸含量也較高。
　　 為了篩選到斜生柵藻基因工程選擇標(biāo)記,我們研究了斜生柵藻對八種常用試劑:氨芐青霉素、卡

3、那霉素、慶大霉素、潮霉素、鏈霉素、草胺膦(phosphinothricin PPT)、G418和氯霉素的敏感性。結(jié)果顯示,斜生柵藻對氨芐青霉素、卡那霉素及PFT均不敏感；對較高濃度(500μg／mL)的慶大霉素和潮霉素比較敏感；對鏈霉素、氯霉素及中(300μg／mL)、高濃度(500μg／mL)的G418非常敏感。通過計算斜生柵藻在各種試劑不同濃度影響下的比生長速度,發(fā)現(xiàn)鏈霉素、氯霉素及中、高濃度的G418能夠很好地抑制斜生柵藻的生長。

4、這一結(jié)果為篩選出斜生柵藻基因工程選擇試劑,建立其遺傳轉(zhuǎn)化體系奠定了基礎(chǔ)。
　　 為了篩選到舟形藻的基因工程選擇標(biāo)記,我們同樣選用上述七種常用抗生素及植物遺傳轉(zhuǎn)化中常用到的PPT,來初步研究舟形藻對它們的敏感性。結(jié)果顯示,舟形藻對卡那霉素、氨芐青霉素、慶大霉素、鏈霉素及PPT都不敏感；對較高濃度(500μg／mL)的潮霉素比較敏感；對中(300μg／mL)、高濃度(500μg／mL)的G418及氯霉素非常敏感。G418和氯霉素在高